PRUEBAS BIOQUIMICAS

PRUEBAS BIOQUÍMICAS
Los medios de cultivo especiales también denominados bioquímicas son peculiares y necesarios para poder determinar la especie bacteriana del cultivo realizado, es decir, nos permite tener un resultado más específico. Por ello, se debe tener atención desde la forma de preparación, siembra y lectura de resultados. Nos apoyaremos en tablas de bioquímicas y reactivos adecuadospara su mejor observación.
La siembra de las pruebas bioquímicas se realiza después de la resiembra, con la finalidad de realizar la prueba a un organismo ya aislado y poder contribuir a su correcta identificación.
Las enterobacterias fermentan numerosos azúcares. En el trabajo de rutina se emplean sólo algunos y que nos servirán para diferenciarlas.
Los medios para bioquímicas más comunesson:
a) AGAR CITRATO DE SIMMONS:
Se puede emplear para la prueba de utilización de Citrato como una de las pruebas del IMVIC.
La aparición de un crecimiento visible va por lo general acompañada de un cambio alcalino (azul del indicador bromotimol).
Negativos Positivos
Escherichia
Shigella
Listeria Arizona
Enterobacter
Citobacter
KlebsiellaSalmonella

Prueba negativa / Prueba positiva
Agar Hierro de Kligler
Es un medio para diferenciar bacilos entéricos gram negativos con una forma similar al TSI (hierro y triple azúcar) y se basa en las mismas propiedades de fermentar la glucosa y lactosa junto con la formación de sulfuros, éste medio se debe inocular por picadura en el fondo y estría en la superficie.
Losgérmenes fermentadores de la lactosa acidifican totalmente el medio, comunicándole a este un color amarillo, los microorganismos que no la fermentan acidifican el fondo del medio permaneciendo del color rojo cereza inicial y por último los formadores de ácido sulfhídrico ennegrecen el medio. Se recomienda usar el medio el mismo día de su preparación. En este medio se pueden observar lasfermentaciones de la glucosa, lactosa y la producción del sulfuro de hidrógeno y gas.
Interpretación de resultados
Tubo C: Control
Rojo: Bacterias utilizan peptonas y alcalinizan el medio. (Tubos 1, 2 y 3)
Fondo amarillo: Fermenta la glucosa. (Tubos 2, 4 y 4 A)
Superficie amarilla: Fermenta la lactosa. (Tubo 5)
Trayecto de la picadura negro: Produce sulfuro de hidrógeno. (Tubos 3 y 5)
Formación deburbujas en el medio y elevación del mismo: produce gas. (Tubos 4 y 4A)


Medio MIO:
Se usa para la identificación de Enterobacterias sobre la base de movilidad, ornitina descarboxilasa y de indol.
La movilidad es apreciada por la turbiedad del medio o por crecimiento extendido a partir de la línea de inoculación. La ornitina es indicada por el color púrpura del medio y la prueba negativaproduce un color amarillo, que puede ser púrpura al final. Para la prueba del indol la aparición del color rosa o rojo del reactivo, se interpreta como prueba positiva del indol y siempre se deberá comparar con un tubo testigo.


Medio SIM
Sirve para diferenciación e identificación de Enterobacterias, es un medio semisólido, de rutina y que detecta la producción de sulfuros, indol ymovilidad de las mismas.
En este medio se puede observar la producción de sulfuro de hidrógeno, de Indol y la movilidad del microorganismo.
Resultados Indol Resultados movilidad

Prueba Prueba Prueba Prueba
positiva negativa negativa positiva

Caldo de Urea
Seemplea para la identificación de bacterias, particularmente para diferenciar los miembros del género Proteus de la Salmonella y Shigella.
También puede usarse para la determinación de la actividad de la ureasa en microorganismos de la familia Brucella, Bacillus, Sarcina y Mycobacterium.


Prueba negativa / Prueba positiva
El IMVIC es una prueba utilizada en biología para la...