Puntos isoelectricos

I
TEMA: PUNTOS ISOELÉCTRICOS Y SU USO
OBJETIVOS:

MARCO TEÓRICO
El punto isoelétrico (pI) se define como el pH en el que los aminoácidos naturales o cualquier otra especie anfótera tiene carga0.
El concepto es particularmente interesante en losaminoácidos y también en las proteínas. A este valor de pH la solubilidad de la sustancia es casi nula.
Para calcularlo se deben utilizar los pKa.(Los pKa a considerar para esta ecuación,en una tabla de pH, son los que contienen a la especie química con carga igual a cero, cuando tienen más de un pKa).
Las moléculas complejas, tales comolas proteínas, se combinan con los iones hidrógeno y con otros iones presentes en la disolución, dando lugar a la carga neta de la molécula. A la concentración de iones hidrógeno, o al pH, para el cualla concentración del ion híbrido de una proteína es máxima y el movimiento neto de las moléculas de soluto en un campo eléctrico es prácticamente nulo, se le denomina punto isoeléctrico.Los aminoácidos pueden existir como sal interna, llamada zwitterión. Esto ocurre porque un electrón del oxígeno del grupo carboxilo es atraído por el grupo amino NH2 (ya que al nitrógeno le sobraban dos electronesde valencia) que está en posición alfa y quedando este como grupo amoníaco NH3+.


2. ¿CÓMO SE HALLA EXPERIMENTALMENTE EL PUNTO ISOELÉTRICO?
Para hallar experimentalmente el punto isoelétrico deun aminoácido hay que realizar una valoración con una especie básica, como el hidróxico sódico (NaOH).
En un vaso de precipitados colocamos un pHmetro con un agitador magnético, añadimos elaminoácido a valorar y con una bureta vamos añadiendo pequeñas cantidades de sosa (Hidróxido sódico) hasta la valoración completa del aminoácido. Por cada adición de sosa debemos registrar el pH del vaso deprecipitados. Cuando acabemos la valoración, hay que representar gráficamente el pH frente a la cantidad de Hidróxico sódico añadido y nos resultará una gráfica similar a la siguiente:
 

Figura...