Qímica de 6 Cobas C111

GLUCOSA
INTRODUCCION

Aunque hace ya más de 100 años que se describieron los primeros métodos para la determinación de glucosa en sangre y orina, estos eran complicados y poco específicos. En la actualidad, de los métodos existentes para medir glucosa pueden hacer dos categorías:


Métodos Químicos: muchos métodos cuantitativos para la medición de glucosa en sangre, están basados en lacapacidad reductora de este monosacáridos; entre estos métodos están el de Folin y Wu (1920), y Nelson-Somogy (1944), que requerían una desproteinización previa del suero y un calentamiento prolongado para el desarrollo de color, lo cual provocaba una serie de fuentes de imprecisión; además, al reaccionar otros compuestos reductores presentes en la muestra, producían inexactitud y pocaespecificidad. Hultman publicó en 1959 una técnica en la que se emplea de la o-toluidina en ácido acético glacial, la cual requiere de un período de calentamiento corto (8min) y se puede utilizar para el análisis de suero o plasma sin necesidad de precipitación previa. La gran sensibilidad de este método permite determinar concentraciones del orden de 20mg/dl, utilizando muestras de 20l. se han propuestodiferentes modificaciones a este método como la de Dubowsky quien perfeccionó esta técnica, la de Hyvarien y Nikkita que la modificaron al añadir tiourea al reactivo de o-toluidina para estabilizarlo. Este método es menos específico que los métodos enzimáticos para la determinación de glucosa pero correlaciona bien con ellos.
Métodos Enzimáticos: ninguno de los procedimientos mencionados hasta ahoraes absolutamente específico para la glucosa. El empleo de enzimas para conseguir una mayor especificidad, inicialmente se llevó a cabo utilizando enzimas de levadura, pero este método no correlacionaba con la medición adecuada de glucosa, por lo cual se utilizó una enzima purificada para aumentar la especificidad. En este sentido, tiene gran importancia la glucosa oxidasa que es específica parala D-glucosa. La glucosa oxidasa fue descubierta en el año d 1928 por Muller; Keilin y Hartree (2) quienes la utilizaron, en 1948, para la determinación de glucosa en materiales biológicos mediante una técnica manométrica. Keston en 1956 (4), propuso el uso del sistema glucosa oxidasa (GOD)-peroxidasa (POD) para la cuantificación de la glucosa:

〖β-D-Glucosa+O_2+H_2 O□(→┴GOD ) ÁcidoGlucónico+H〗_2 O_2
H_2 O_2+Aceptor Cromógeno de Oxígeno□(→┴POD Cromóforo)

Sin embargo, fue Teller en el mismo año, que utilizando el sistema propuesto por Keston, público un procedimiento que podía ser utilizado como una técnica de rutina para la determinación específica de glucosa en sangre y orina.

Existe una gran variedad de métodos para determinar la glucosa en sangre, suero, plasma, líquidocefalorraquídeo y orina. Estrictamente hablando, todos presentan ventajas e inconvenientes. En la actualidad, los métodos de referencia son el de la hexocinasa/UV y el de rutina, el de la glucosa oxidasa. Por ello, la especificidad de los otros métodos se debe referir en términos de la cercanía de los valores que se obtienen con respecto a los obtenidos con el método de referencia.

Los métodosenzimáticos para la determinación de glucosa son los que dan el máximo grado de especificidad y confiabilidad.

En la actualidad, muchas casas comerciales ofrecen equipos de diagnóstico, para la determinación de glucosa por el método enzimático, sin embargo, no todas cumplen las disposiciones marcadas por la Federación Internacional de Química Clínica (7,8). A pesar de ello, estos equipos de diagnósticoson ampliamente utilizados.
 
Generalidades

La glucosa constituye el carbohidrato más frecuente en la sangre periférica. Su oxidación representa la principal fuente de emergía para las células del organismo. La glucosa procedente de la nutrición se convierte a glucógeno para ser almacenada en el hígado o ácidos grasos para su depósito en el tejido adiposo. La concentración de glucemia...