R12 Exoenzimas

RESUMEN
Para que una célula viva, crezca y se reproduzca, debe ser capaz de incorporar y transformar (metabolizar) los compuestos químicos que necesita para obtener energía, así como las moléculas que pasarán a su material celular.
Las enzimas juegan un papel importante, ya que son catalizadores biológicos de naturaleza proteica y actividad específica, y el tipo de éstas o de lossistemas enzimáticos varía en los diferentes µoorg.
RESULTADOS
Se inocularon, en 5 distintos medios de cultivo, distintos microorganismos para comprobar la existencia de diferentes exoenzimas en el metabolismo microbiano.
a) Colonia proveniente de conservación, se sospecha que es Serratia marcescens.
b) Colonia proveniente de conservación, se sospecha que es la levadura Rhodotorula sp.
c) Pseudomonaaeruginosa
d) Bacillus subtilis
e) Bacillus cereus
f) Streptococcus oralis
g) Streptococcus pyogenes
h) Lactobacillus sp
i) Serratia marcescens
j) Coliforme, Enterobacter
k) Staphylococcus aureus
l) Enterococcus faecalis
Así mismo se emplearon los siguientes medios:
i) Agar sangre
ii) Agar almidón
iii) Leche descremada
iv) Agar DNA
v) Agar gelatina
La inoculación en los diversos medios fue de lasiguiente manera:







Se obtuvieron los siguientes resultados:
Agar
a
b
c
d
e
f
g
h
i
j
k
l
Sangre
γ
γ
γ
/
β
γ
β
/
/
γ
β
γ
Almidón
+
-
+
+
+
/
/
/
/
-
/
/
Leche D
+
-
-
+
/
/
/
-
+
-
/
/
DNA
+
-
-
-
-
/
/
-
/
-
+
/
Gelatina
+
/
+
/
/
/
/
/
/
/
/
/

ANALISIS DE RESULTADOS
Las exoenzimas son un tipo de enzima que pueden estar presentes en las bacterias como parte de su metabolismo. Son un tipo deenzimas producidas en el interior de la célula pero que salen a su exterior para convertir moléculas complejas en moléculas más sencillas que son llevadas al interior de la célula para ser integradas al metabolismos. En esta práctica se utilizaron distintos medios de cultivo para observar la modificación del medio que la presencia de las exoenzimas causan. En primer lugar se analizarán losresultados de las colonias inoculadas en el agar DNA. Éste agar contiene DNA altamente polimerizado, después de la inoculación e incubación se procedió a usar un agente revelador: HCl para diferenciar o no la polimerización del DNA ya que este no es perceptible por sí solo para el ojo humano. Cuando se vertió una gota del ácido a la estría de Serratia marcescens y Staphylococcus aureus se observó unhalo transparente alrededor de la colonia. En cambio en las estrías provenientes de Pseudomona aeruginosa, Bacillus subtilis, Enterobacter, Bacillus cereus, Lactobacillus sp. y la colonia sospechosa de Rhodotorula se presentó un precipitado blanquizco. El revelador HCl al interaccionar con el DNA forma un precipitado, la formación de este precipitado indica que el DNA nuca se rompió, lo que lleva aconcluir que no existe DNAsa en Pseudomona aeruginosa, Bacillus subtilis, Enterobacter, Bacillus cereus, Lactobacillus sp. y la colonia sospechosa de Rhodotorula. Por otro lado la existencia del halo alrededor de Serratia marcescens y Staphylococcus aureus evidencia que no existió DNA polimerizado con el cual el HCl pudiese actuar. Según el artículo Extracellular Deoxyribonuclease Production byYeasts el género Rhodotorula es prodcutor de la enzima en cuestión; en nuestros resultados la prueba resultó negativa, esto puede deberse a un error en la lectura de la prueba lo que llevó a la mala conclusión de catalogarla como negativa. Los resultados leídos como positivos son acordes a lo descrito en la literatura. Según la ficha descriptiva del agar de DNA emitida por los laboratorios MerckKGaA, Bacillus cereus es otro microorganismo que produce la DNAsa, nuevamente en la revelación de la prueba se le catalogó como un organismo (-) a la enzima, se achaca el mismo error en la observación del revelado que llevó a la mala conclusión.
En cuanto al agar sangre, éste es ocupado para determinar la actividad hemolítica de diversos microorganismos. Ésta actividad es atribuida a la existencia...