radioinmunoensayo

Radioinmunoensayo
Es una de las técnicas más sensibles para detectar un antígeno o anticuerpo (RIA), fue desarrollada en 1960 por dos endocrinólogos S.A Berson y Rosalyn Yalow, para determinar lasconcentraciones de complejos de insulina en diabéticos.
Esta prueba pronto demostró su valor para medir hormonas, proteínas séricas, fármacos y vitaminas a concentraciones de 0.001 microgramos pormililitro o menos.
Esta técnica se reconoció en 1977, el principió de la RIA implica la unión competitiva del antígeno radio marcado y el antígeno no marcado a un anticuerpo de alta afinidad. Elantígeno marcado se mezcla con anticuerpo a una concentración que satura los sitios de unión a antígeno del anticuerpo.
Posteriormente se añade en cantidades crecientes las muestras del antígeno no marcadode concentración desconocida.
El anticuerpo no distingue el antígeno marcado del no marcado por lo que estos dos tipos de antígenos compiten por los sitios de unión disponibles en el anticuerpo,conforme la concentración de antígeno no marcado aumenta, mas antígeno con la marca radiactiva es desplazado de los sitos de unión.
El decremento de la cantidad del antígeno radio marcado que se une alanticuerpo específico en presencia de la muestra en estudio se mide para determinar la cantidad del antígeno que esta última contiene.
Se han creado diversos RIA de fase solida que hacen más fácilsepara el complejo Ag-Ab del antígeno no unido, en algunos casos el anticuerpo se une por enlaces cruzados covalentes a cuentas de sepharose, la cantidad del antígeno radio marcado unido a las cuentaspuede medirse después de centrifugar y lavar estas últimas.
De modo alternativo el anticuerpo se inmoviliza en fosos de polietileno o poli cloruró de vinilo y la cantidad de antígeno marcado libre enel sobrenadante se determina en un contador de radiación.
En otro método se inmoviliza el anticuerpo en las paredes de los fosos de micro titulo y se determina la cantidad de antígeno unido.
Este...