Reacción acrosomal

IHEM

CONICET

Mecanismos Moleculares involucrados en
la exocitosis acrosomal del
espermatozoide humano.

.

Doctorando: Licenciada Cecilia Inés Lopez
Director: Dr. Luis Mayorga
Co-directora: Dra. Silvia Belmonte
Lugar de trabajo: Laboratorio de Biología
Celular y Molecular, IHEM-CONICET, Facultad
de Ciencias Médicas, Universidad Nacional de
Cuyo

A mi familia
A todos los que de alguna manera meacompañan día a día

2

Agradecimientos
Por darme la oportunidad de doctorarme:
IHEM-CONICET
Universidad Nacional de Cuyo
PROBIOL
CONICET
Por dirijirme:
Luis Mayorga
Silvia Belmonte
Por formar parte de mi comité tutorial:
Alicia Penissi
Miguel Sosa
Roberto Yunes
Por su asesoramiento:
Claudia Tomes
Por su ayuda y su compañía día a día:
Natalia Zanetti
Teresita Branham
Laura Gomez

3

DiegoMarzese
Sebastián Real
Laila Suhaiman
Leonardo Pelletán
Marcelo Roggero
Gerardo De Blas
Jimena Castillo
Oscar Bello
Marcelo Rodríguez Peña
Facundo Rodríguez
Matías Bustos
Valeria Zarelli
Virginia Gonzalez Polo
Maximiliano Gutierrez
Cristina Vazquez
Emanuel Campoy
Cecilia Lerena
Natalia Leiva
Y a todos aquellos que de alguna manera estuvieron conmigo y me apoyaron durante todo
este tiempo….

Gracias

4INTRODUCCIÓN ............................................... 6
La fertilización ....................................................................................... 7
El espermatozoide ................................................................................. 9
La capacitación .................................................................................... 15
Motilidadhiperactivada y quimiotaxis........................................................... 19
La reacción acrosomal ......................................................................... 21
Modelo de espermatozoides permeabilizados ............................................. 27
Maquinaria proteica involucrada en la fusión de membranas durante la
exocitosis acrosomal........................................................................................ 29

HIPÓTESIS Y OBJETIVOS............................... 35
Hipótesis.............................................................................................. 36
Objetivos .............................................................................................. 37
Objetivo General............................................................................................. 37
Objetivos específicos....................................................................................... 37

MATERIALES Y MÉTODOS ............................ 40
RESULTADOS .................................................... 49
La salida de colesterol regula el anclaje de Rab3A a las membranas 50
Antecedentes.................................................................................................... 50
Resultados ......................................................................................................... 55
Desarrollo de técnicas que permitan producir proteínas
recombinantes permeables a membranas – Estudio de la función de
Rab3A en espermatozoides no permeabilizados................................ 60
Rol de lípidos comosegundos mensajeros en la reacción acrosomal 76

DISCUSIÓN ........................................................ 94
Aporte original de la tesis .................................................................... 95
Perspectivas ........................................................................................ 102

BIBLIOGRAFÍA................................................ 105
APÉNDICE:...................................................... 130
Abreviaturas utilizadas ....................................................................... 131

5

INTRODUCCIÓN

6

La fertilización
La fertilización es el proceso por el cual el espermatozoide se fusiona con el
ovocito, se combina la información genética de ambas gametas y se forma un
embrión (1;2). El espermatozoide eyaculado no...