recuento en placa

FISIOLOGÍA MICROBIANA





PRESENTADO POR:
LAURA MERCADO SALAS





DOCENTE:
JUAN CARLOS PRADA






UNIVERSIDAD POPULAR DEL CESAR
VALLEDUPAR 2012-09-03



MÉTODOS PARA EVALUAR EL CRECIMIENTO POBLACIONAL
El crecimiento de las poblaciones microbianas puede medirse de diferentes maneras. Algunos métodos determinan el número de células y otros la masa total de lapoblación, que a menudo es directamente proporcional al número de células. Como las poblaciones bacterianas suelen ser muy grandes la mayoría de los métodos de cuantificación se basan en mediciones directas o indirectas de muestras muy pequeñas; despues se determina mediante cálculos el tamaño de la población total. Sin embargo, este método resulta poco práctico para medir una millonésima parte de unmililitro de líquido o de un gramo de alimento. Por consiguiente el procedimiento se efectúa indirectamente en una serie de diluciones. Si mediante una serie de diluciones de este tipo se puede estimar con facilidad el número de bacterias en la muestra original.
Métodos directos
El método utilizado con más frecuencia para la medición de poblaciones bacterianas es el recuento en placa. Unaventaja importante de esta técnica es que mide el número de células viables. Una desventaja es que requiere bastante tiempo, por lo general 24 horas o más, para que se formen colonias viables. El recuento en placa se basa en la suposición de que cada colonia crece y se divide para producir una sola colonia. Cuando se realiza el recuento en placa es importante que se crezca solo un número limitado decolonias en la placa, si bien muchos microbiólogos prefieren placas con 30 a 300 colonias. Para asegurar que algunos recuentos estén dentro de estos límites el inoculo original se diluye varias veces en un proceso denominado dilución seriada.
El recuento en placa se efectúa con el método de placa vertida o con el método de diseminación en placa. El método de placa vertida es una técnica que tienealgunos inconvenientes por que ciertos microorganismos relativamente sensibles al calor pueden resultar dañados por le agar fundido y por siguiente ser incapaces de formar colonias. Para evitar estos problemas con frecuencia se utiliza el método de diseminación en placa que permite el crecimiento de todas las colonias sobre la superficie del medio y evita el contacto de las células con el agarfundido.
Cuando la cantidad de bacterias es muy baja, como en lagos o en ríos con corrientes relativamente limpias las bacterias se pueden contar con métodos de filtración. Este método se aplica con frecuencia para la detección y cuantificación de bacterias coliformes, que son indicadoras de la contaminación fecal de los alimentos o el agua. Las colonias formadas por estas bacterias soncaracterísticas cuando se utiliza un medio nutritivo diferencial.
Otro método que se utiliza para la determinación del numero de bacterias presentes en una muestra es el método del numero más probable (NPM), esta estimación estadística se basa en el hecho de que cuanto mayor sea el numero de bacterias en una muestra mayor será la dilución necesaria para reducir la densidad hasta el punto en el cual no sedesarrolle ninguna bacteria en los tubos de una serie de diluciones. El método del NPM es el más útil cuando los microorganismos por contar no crecen en medios sólidos. También es útil cuando se utiliza el crecimiento en un medio líquido diferencial para identificar el microorganismo.
En el método conocido como recuento microscópico directo un volumen medido de una suspensión bacteriana se colocadentro de un área definida en un portaobjeto. Para los recuentos microscópicos directos también se usa un portaobjeto diseñado especialmente denominado cámara de petroff- Hausser. Las bacterias móviles son difíciles de contar con este método y, como sucede con otros métodos microscópicos, las células muertas presentan un aspecto similar al de las vivas que se puede contar. Además de estas...