Resumen Y Laboratorio Histologia

MICROSCOPIO ÓPTICO
Práctica 1
Es el más utilizado por nosotros los estudiantes. Por medio de él, nos es posible observar y analizar las estructuras histológicas en nuestras laminillas con un aumento y resolución mayor (0.2 µm) a la que se puede observar a simple vista (0,2 mm).

Los componentes esenciales del microscopio son:
Sistema de iluminación: para iluminar la muestra (luz).
Lentecondensadora: para enfocar la luz hacia la muestra.
Platina: en la que se coloca el portaobjetos.
Lente objetivo: recoge la luz que atraviesa la muestra, la mayoría de los microscopios óptico cuentan con 4 objetivos: lupa (4x), seco débil (10x), seco fuerte (40x) e inmersión (100x).
Lentes oculares por el cual se examina directamente la imagen formada por el objetivo.
Tipos de microscopio:
Microscopiode campo oscuro: analizar partículas con escaso contraste en la microscopia óptica y para el análisis radioautográfico.
Microscopio de contraste de fase: para observar células vivas.
Microscopio de luz polarizada: se obtiene información de la estructura celular a nivel molecular.
Microscopio de interferencia: determinar la densidad de la masa de los elementos celulares individuales.
Microscopiade fluorescencia: las estructuras celulares aparecen como fuentes luminosas.
Microscopio de barrido confocal: mediante imágenes bidimensionales se construye una tridimensional.
Microscopio de luz ultravioleta: permite detectar los ácidos nucleicos.
Microscopio electrónico de trasmisión (MET): usa un haz de electrones como fuente luminosa que atraviesa la muestra y nos permite un poder deresolución de 0.2 nm por ello es posible lograr aumentos útiles superiores a 500,000 veces.
Microscopio electrónico de barrido (MEB): el haz de electrones barre la superficie del preparado por los cual nos brinda una imagen en tercera dimensión.
METODO HISTOLÓGICO
Práctica 2
Preparación de tejidos
La obtención del tejido se puede realizar mediante:
Biopsia insicional
Biopsia excisional
Biopsiatransoperatoria
Biopsia trucut
Pieza quirúrgica



Los pasos necesarios para la preparación de tejidos para la microscopia electrónica son:
1) Fijación: tratamiento del tejido con sustancias químicas que retardan las alteraciones tisulares subsecuentes a la muerte y conservan su configuración normal. Los agentes para fijación usados más a menudo en microscopia de luz son formalina amortiguada y fijador deBouin.
2) Deshidratación y aclaramiento: se aplica una serie gradual de baños de alcohol iniciando con alcohol al 50% y alcanzando de manera paulatina el alcohol al 100% para eliminar el agua. A continuación, el tejido se trata con xileno, una sustancia química que es miscible con parafina fundida.
3) Inclusión: Se coloca el tejido en un recipiente adecuado con parafina fundida hasta que seinfiltra por completo. Una vez que se impregna el tejido con parafina, se coloca en un receptáculo pequeño, recubierto con parafina fundida y se deja endurecer para formar un bloque de parafina que incluya al tejido.

4) Seccion: Se lleva a cabo mediante un micrótomo. Para la microscopia de luz, el grosor de cada corte fluctúa entre 5 y 10 pm.
5) Montaje y tinción: Los cortes de parafina se montan(colocan) en portaobjetos de vidrio y a continuación se tiñen mediante colorantes hidrosolubles que permiten diferenciar los diversos componentes celulares.

Tipos de tinciones
REACTIVO
RESULTADO
Hematoxilina
Azul: núcleo, regiones acidas del citoplasma, matriz del cartílago
Eosina
Rosa: regiones básicas del citoplasma, fibras de colágena
Tricrómica de Masson
Azul oscuro: núcleo; rojo: musculo,queratina, citoplasma.
Azul claro: mucinógeno, colágena.
Colorante de orceína para fibras elásticas
Pardo: fibras elásticas.
Colorante de Weigert para fibras elásticas
Azul: fibras elásticas.
Tinciones argénticas (Veerhoeff)
Negro: fibras reticulares.
Hematoxilina férrica
Negro: estriaciones de musculo, núcleos, eritrocitos.
Ácido periódico de Schiff
Magenta: moléculas ricas en glucógeno y...