Semicuatificcion De La Expresion De Un Gen
← transcriptasa reversa o retrotranscriptasa es una enzima de tipoADN-polimerasa, que tiene como función sintetizar ADN de doble cadena utilizando como molde ARN monocatenario, es decir, catalizar la retrotranscripción
← La enzima RNasaH es un no-específica endonucleasa y cataliza la escisión de ARN a través de un mecanismo de hidrólisis. RNasa H específicamente degrada el ARN en el ARN: híbridosde ADN y no se degradan ADN o ARN sin hibridar, es comúnmente usado para destruir la plantilla de ARN después de la primera línea de ADN complementario (ADNc) lasíntesis de la transcripción reversa , así como los procedimientos, tales como ensayos de protección nucleasa .
← Los desoxirribonucleótidos son los monómeros queconstituyen el ADN.
Buffer TBF 5X: formada por Tris, borato y EDTA, sirve para separar ácidos nucleicos.
▪ El Tris es la molécula responsable de la regulación delpH.
▪ El borato contribuye a ajustar el pH deseado e igualmente a mantenerlo.
▪ El EDTA es un quelante de cationes divalentes cuya función es secuestrar el Mg2+,con lo que se evita que las posibles nucleasas presentes degraden los ácidos nucleicos de la muestra (la mayoría de las nucleasas requieren Mg2+ como coenzima).
2-Amplificacion del cDNA : amplificación mediante PCR normal
← Transcripcion reversa:
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En resumen
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