Separación De Los Pigmentos De La Hoja De Espinaca Mediante Cromatografía En Capa Fina

 Momentos de Ciencia, 2013

Separación De Los Pigmentos De La Hoja De Espinaca Mediante Cromatografía En Capa Fina
KAREN V ORTIZ
1 Facultad de Ciencias Básicas. Programa de Biología. Universidad de la Amazonia. Florencia (Caquetá). Colombia.
Recibido 12 de Noviembre de 2013. __________________________________________________________________
Resumen
Para realizar elanálisis y la separación de los pigmentos presentes en la espinaca, se llevó a cabo un estudio general de la cromatografía en capa fina de adsorción solido-liquido, que se desarrolló en el laboratorio de Química Orgánica de la Universidad de la Amazonia (Florencia, Caquetá). Esta técnica consistió en preparar la fase estacionaria, la cual se depositó en tres puntos específicos la muestra extraídade la espinaca en un adsorbente sólido como gel de sílice, donde se introdujo en un tarro cerrado contenido de una fase móvil liquida que fueron varias mezclas de disolventes. Todas estas sustancias presentaron un grado diferente de solubilidad, ya que las más solubles se desplazaron a mayor velocidad, mientras que las menos solubles avanzaron con más lentitud de la fase estacionaria; dependiendodel desplazamiento, se calculó el coeficiente Rf de cada uno de los puntos y se logró determinar el pigmento de mayor presencia en la espinaca. Estos pigmentos fotosintéticos que componen a las plantas y se encuentran en los cloroplastos de las células vegetales es la causa de que esas partes de las plantas aparezcan verdes. © 2013 Universidad de laAmazonia. Todos los derechos reservados.

Palabras clave: Cromatografía, disolvente, polar, apolar, pigmentos, fase móvil, fase estacionaria, gel de sílice, Rf

Introducción
La fotosíntesis, proceso que permite a los vegetales obtener la materia y la energía que necesitan para desarrollar sus funciones vitales, se lleva a cabo gracias a la presencia en las hojas y en los tallos jóvenes de pigmentos,capaces de captar la energía lumínica. (James, W.O. 1967)
Entre los distintos métodos que existen para separar y obtener esos pigmentos se encuentra el de la cromatografía, que es una técnica que permite la separación de las sustancias de una mezcla y que tienen una afinidad diferente por el disolvente en que se encuentran. De tal manera que al introducir una tira de papel en esa mezcla eldisolvente arrastra con distinta velocidad a los pigmentos según la solubilidad que tengan y los separa, permitiendo identificarlos perfectamente según su color. (Tabla 1) (Ávila Z. G. 2001)
Pigmento
Color
Clorofila A
Verde azulado
Clorofila B
Verde amarillento
Carotenos
Naranja
Xantofilas
Amarillo
Tabla 1. Color de los pigmentos según la presencia de los puntos de arrastre.
La cromatografíaen capa fina se basa en la preparación de una capa, uniforme de un absorbente mantenido sobre una placa, la cual puede ser de vidrio, aluminio u otro soporte. La fase móvil es líquida (Tabla 2) y la fase estacionaria consiste en un sólido (Tabla 3). La fase estacionaria será un componente polar y el eluyente será por lo general menos polar que la fase estacionaria, de forma que los componentesque se desplacen con mayor velocidad serán los menos polares.
Eluyente
Polaridad
Constante Dieléctrica
Hexano
Apolar
2
Cloroformo
Apolar
4,8
Acetona
Polar
21
Etanol
Polar
24
Tabla 2. Eluyentes más comunes para cromatografía en capa fina.
Adsorbente
Tipo
Gel de sílice
Se utiliza en el 80% de las separaciones
Oxido de aluminio
Acida, neutra o básica
Celulosa
Nativa o microcristalina
Tabla 3. Adsorbentes más comunes para cromatografía en capa fina
La mezcla a analizar se deposita a una pequeña distancia del borde inferior de la placa y se introduce en una cubeta que contiene la fase móvil, que asciende a lo largo de la placa por capilaridad, desplazando a los componentes de la mezcla a diferentes velocidades, lo que provoca su separación. Cuando el frente del...