separacion de hongo vs levadura
Páginas: 5 (1134 palabras)
Publicado: 3 de diciembre de 2013
La separación de tres microorganismos se llevo a cabo en base al artículo FLORA MICROBIANA EN MIELES DE LA REGIÓN DE MURCIA, ESPAÑA tomando como referencia 3 microorganismos los cuales fueron aspergillus clavatus, Salmonella thypi y levaduras blastomyces dermatitidis.
Tamaños de los microorganismos:
• Aspergillus clavatus: Se encuentran desde un tamaño de hifas de 6 µm. micras de diámetrocon esporas que se encuentran con un tamaño de 10 µm. micras de diámetro.
• blastomyces dermatitidis (levaduras): tamaño de 15 µm. micrómetros ovales redondas pared gruesa unigemables refringente.
• Salmonella thypi: tamaño de 0.6 µm de grueso con 2 µm de largo.
Primeramente se realizo la separación de la bacteria de la mezcla de 3 organismos mediante la técnica de filtración: se realizópor la técnica de filtración en membrana (filtro Sartorius). Se filtraron 5 g de miel disueltos en 50 ml de agua destilada estéril, y se incubaron en placas con medio.
La línea de productos de filtros de membrana Sartorius incluye una amplia selección de materiales de membrana para la microfiltración con tamaños del poro desde 0,1 micras hasta 8 micras y para la ultrafiltración con una tasa deretención molecular desde 300.000 hasta 1.000 Dalton. Las aplicaciones típicas para los filtros de membrana son la retención de células, recogida de partículas, clarificación y filtración estéril de soluciones acuosas, análisis de partículas, análisis microbiológico y microscopía de epifluorescencia.
Procedimiento
1.-Marque las placas de Petri y formularios de informe con la identificación de lamuestra y volúmenes de muestra con agua tamponada estéril.
2.- Colocar un filtro de membrana estéril sobre la base del filtro, rejilla si tiene hacia arriba y coloque el embudo a la base de manera que el filtro de membrana está sujeta entre el embudo y la base.
3.- Agite de muestra vigorosamente unas 25 veces paradistribuir uniformemente los microorganismos y medir el volumen deseado de la muestra o la dilución en el embudo.
4.-Se filtra la muestra y enjuagar las paredes de la chimenea por lo menos dos veces con 20-30 ml de buffer de enjuague de agua estéril. Apague la aspiradora y retire el embudo de la base del filtro.
5.-Usar pinzas estériles paraeliminar asépticamente el filtro de membrana a partir de la base del filtro, y rodar sobre el agar rosa de bengala para evitar la formación de burbujas entre la membrana y la superficie del agar. Vuelva a colocar la membrana si se producen burbujas. Ejecutar la pinza alrededor del borde del filtro para asegurarse de que el filtro está asentado correctamente sobre el agar. Cierre el plato, invertir, eincubar de forma aeróbica a 22-25ºC durante 5 días
Identificación de salmonella thypi.
Posteriormente se realizo diluciones del filtrado el cual contiene las bacterias salmonella thypi con agua esterilizada.
1.-Se realizo la toma de 1 ml. de la solución original (filtrado) y se coloco en 9 ml. en un primer tubo 10-1.
2.-Para la segunda dilución serealizo la toma de 1 ml. de la 10-1 y se coloco en segundo tubo con 9ml. de agua siendo una dilución 10-2.
3.- Se toma 1ml. de la solucion de 10-2 y pasa a un tubo con 9ml. de agua siendo la tercera dilucion 10-3
4.- Por último se toma 1ml. de la dilución 10-3 y se coloco en un tubo con 9ml. de agua siendo la cuarta dilución 10-4
Se realizo el vaciado en placa tomando una muestra de 1ml.de la dilución 10-4 colocando en medio del la caja petri y posteriormente realizando el vaciado del agar salmonella shigella y se realizo la identificación de la bacteria.
Identificación de la bacteria.
Incubar a 35±2ºC de 24 a 48 horas Color del medio: amarillo muy claro a rosa
pH: 7,0±0,2
Microorganismos Salmonella typhi
Desarrollo Satisfactorio
Color de la Colonia Incolora...
Tamaños de los microorganismos:
• Aspergillus clavatus: Se encuentran desde un tamaño de hifas de 6 µm. micras de diámetrocon esporas que se encuentran con un tamaño de 10 µm. micras de diámetro.
• blastomyces dermatitidis (levaduras): tamaño de 15 µm. micrómetros ovales redondas pared gruesa unigemables refringente.
• Salmonella thypi: tamaño de 0.6 µm de grueso con 2 µm de largo.
Primeramente se realizo la separación de la bacteria de la mezcla de 3 organismos mediante la técnica de filtración: se realizópor la técnica de filtración en membrana (filtro Sartorius). Se filtraron 5 g de miel disueltos en 50 ml de agua destilada estéril, y se incubaron en placas con medio.
La línea de productos de filtros de membrana Sartorius incluye una amplia selección de materiales de membrana para la microfiltración con tamaños del poro desde 0,1 micras hasta 8 micras y para la ultrafiltración con una tasa deretención molecular desde 300.000 hasta 1.000 Dalton. Las aplicaciones típicas para los filtros de membrana son la retención de células, recogida de partículas, clarificación y filtración estéril de soluciones acuosas, análisis de partículas, análisis microbiológico y microscopía de epifluorescencia.
Procedimiento
1.-Marque las placas de Petri y formularios de informe con la identificación de lamuestra y volúmenes de muestra con agua tamponada estéril.
2.- Colocar un filtro de membrana estéril sobre la base del filtro, rejilla si tiene hacia arriba y coloque el embudo a la base de manera que el filtro de membrana está sujeta entre el embudo y la base.
3.- Agite de muestra vigorosamente unas 25 veces paradistribuir uniformemente los microorganismos y medir el volumen deseado de la muestra o la dilución en el embudo.
4.-Se filtra la muestra y enjuagar las paredes de la chimenea por lo menos dos veces con 20-30 ml de buffer de enjuague de agua estéril. Apague la aspiradora y retire el embudo de la base del filtro.
5.-Usar pinzas estériles paraeliminar asépticamente el filtro de membrana a partir de la base del filtro, y rodar sobre el agar rosa de bengala para evitar la formación de burbujas entre la membrana y la superficie del agar. Vuelva a colocar la membrana si se producen burbujas. Ejecutar la pinza alrededor del borde del filtro para asegurarse de que el filtro está asentado correctamente sobre el agar. Cierre el plato, invertir, eincubar de forma aeróbica a 22-25ºC durante 5 días
Identificación de salmonella thypi.
Posteriormente se realizo diluciones del filtrado el cual contiene las bacterias salmonella thypi con agua esterilizada.
1.-Se realizo la toma de 1 ml. de la solución original (filtrado) y se coloco en 9 ml. en un primer tubo 10-1.
2.-Para la segunda dilución serealizo la toma de 1 ml. de la 10-1 y se coloco en segundo tubo con 9ml. de agua siendo una dilución 10-2.
3.- Se toma 1ml. de la solucion de 10-2 y pasa a un tubo con 9ml. de agua siendo la tercera dilucion 10-3
4.- Por último se toma 1ml. de la dilución 10-3 y se coloco en un tubo con 9ml. de agua siendo la cuarta dilución 10-4
Se realizo el vaciado en placa tomando una muestra de 1ml.de la dilución 10-4 colocando en medio del la caja petri y posteriormente realizando el vaciado del agar salmonella shigella y se realizo la identificación de la bacteria.
Identificación de la bacteria.
Incubar a 35±2ºC de 24 a 48 horas Color del medio: amarillo muy claro a rosa
pH: 7,0±0,2
Microorganismos Salmonella typhi
Desarrollo Satisfactorio
Color de la Colonia Incolora...
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