Separacion De Proteinas Por Sales
proteínas
La separación y purificación de las proteínas se puede realizar
en base a:
1.
2.
1.
1.
2.
3.
Solubilidad
Precipitación isoelectrica
Fraccionamientopor sales
Tamaño
Cromatografía de exclusión molecular
Carga
Cromatografía de intercambio iónico: catiónica y aniónica
Electroforesis en papel
Electroforesis en geles de poliacrilamida: nativa,denaturante con
SDS y focalización isoelectrica
Afinidad biológica
SOLUBILIDAD DE LAS PROTEINAS: EFECTO DE LA
FUERZA IONICA
La solubilidad de una proteína está
influenciada por los siguientes factores:(a) su composición en aminoácidos (una
proteína rica en aminoácidos polares es en
general más soluble que una rica en
aminoácidos hidrofóbicos);
(b) su estructura tridimensional (las proteínasfibrosas son en general menos solubles que
las globulares);
(c) el entorno de la propia proteína.
Salting in
Solubilidad a baja fuerza iónica (0.001 – 0.02 M)
aumenta con la concentración de sales
→Salting in
Al aumentar la concentración de sales
→ proteína se rodea de contraiones
→ más soluble por mayor interacción proteína
-solvente
Salting out
La solubilidad a alta fuerza iónica ( mayora
0.02M) ) disminuye con la concentración de
sales → Salting out
Capturan el H2O y hay mayor interacción
proteína -proteína
La alta concentración de sal remueve la esfera
de solvatación de laproteína
Las proteínas en H2O tienden a formar
COMPLEJOS electrostáticos → precipitan
FACTORES AMBIENTALES QUE INFLUYEN EN LA
SOLUBILIDAD DE UNA PROTEÍNA
(1) LA TEMPERATURA;
(2) LA CONSTANTE DIELÉCTRICADEL MEDIO;
(3) EL PH DEL MISMO; Y
(4) LA FUERZA IÓNICA.
No se conocen a fondo las razones de la dependencia de la
solubilidad de las proteínas con respecto a la fuerza iónica del
medio; pero locierto es que, en general, las proteínas requieren
algo de sal para entrar en solución (fenómeno de “salting-in”) y
son precipitadas por concentraciones relativamente elevadas de
sales (fenómeno de...
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