Bioquimica metodos de separacion de proteinas

Universidad de Chile Facultad de CienciasDepartamento de QuímicaLicenciatura en Cs. Mc en Química









Laboratorio 3
“Métodos de separación de proteínas”











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Introducción

Las proteínas son compuestos químicos muy complejos que se encuentran en todas las células vivas, porello que es fundamental su estudio para comprender los procesos involucrados en los organismos vivos.
Para poder estudiar detalladamente las proteínas, primero se necesita extraerlas de las células yorganelos subcelulares.

Actualmente existen diversos métodos de separación de proteínas, basados en las distintas propiedades que éstas poseen, por ejemplo, la cromatografía de intercambioiónico, la electroforesis en geles, la filtración por exclusión molecular, entre otros.
En este práctico se estudiará la filtración por exclusión molecular o filtración en gel, la cual es un tipo decromatografía que permite la separación de moléculas en función de su tamaño. En este tipo de cromatografía, la fase estacionaria es una matriz de un polímero hidratado formado por micro esferas porosasque actúan como tamices moleculares. Los geles más utilizados son el dextrano, agarosa y poliacrilamida.
En este práctico se utilizó el gel dextrano (Sephadex G-150), la cual posee un límite deexclusión de 150.000 g/mol.

En esta técnica las moléculas de pequeño tamaño difunden a través de los poros de las partículas del gel y por ello son retardadas en su paso por la columna. Las moléculas...