SIEMBRA EN PLACA SOBRE MEDIOS DIFERENCIALES

SIEMBRA EN PLACA SOBRE MEDIOS DIFERENCIALES
William Andrés Olalla Chicaiza
Laboratorio de Microbiología de los Alimentos II, Facultad de Ciencia e Ingeniería en Alimentos, Universidad Técnica de Ambato
RESUMEN
El objetivo de la práctica fue conocer los principios generales aplicados en medios de cultivo diferenciales con los cuales se permite distinguir diferencias metabólicas de diversasespecies o géneros de bacterias. Los medios de cultivo empleados para el aislamiento de bacterias en una muestra de leche cruda fueron: Agar McConkey y Agar Leche, el Agar McConkey es un medio de diferenciación que posee un indicador de pH, este indicador cristal violeta cambia de color en presencia de colonias que producen ácido a partir de lactosa, el Agar Leche contiene caseína, la caseína es laproteína de la leche que le confiere el color blanco, cuando la caseína es hidrolizada desaparece el color blanco alrededor del crecimiento microbiano. La utilización de Agar McConkey fue el medio en el cual se apreció con mayor diferenciación la presencia de bacterias fermentadoras de lactosa, teniendo que a una dilución de la muestra de 10-4 se obtuvieron 75 colonias de las cuales 4 presentaroncoloración amarillenta, siendo estas las fermentadoras de lactosa, mientras que en el Agar Leche no se obtuvo diferenciación de bacterias capaces de hidrolizar la caseína. En consecuencia, los medios de cultivo elaborados con Agar McConkey nos permiten claramente diferenciar bacterias que pueden fermentar la lactosa, gracias al indicador de pH, cristal violeta, el cual cambia de color a amarillofrente a la formación de ácido.
INTRODUCCION
Los llamados medios diferenciales, son usados para aislar los organismos dentro de una mezcla, por los caracteres diferenciales que presentan. Suelen ser medios sólidos y se basan en la capacidad de fermentación de un determinado azúcar.
En el desarrollo de la práctica se utilizó un medio denominado agar McConkey. Según,,,,,,,,el agar McConkey es un mediode color rosado que posee, entre otras sustancias, lactosa, peptonas, el colorante vital rojo neutro, sales biliares y violeta cristal. Este medio es selectivo contra Gram positivas debido al violeta cristal y a muchas Gran negativas debido a las sales biliares (agentes tensoactivos que desorganizan muchas membranas externas). En cambio las enterobacterias, están evolutivamente adaptadas asoportar las sales biliares en su habitat natural (el intestino de vertebrados superiores) y pueden crecer en este medio.
El agar McConkey es un medio diferencial que permite visualizar dos tipos de bacterias según que puedan fermentar o no la lactosa, con producción de ácidos. Las bacterias fermentadoras de la lactosa, excretan al medio gran cantidad de ácidos orgánicos, lo que provoca que sus coloniasy sus alrededores aparezcan de un color rojo amarillento, debido al viraje del rojo neutro en presencia de ácidos.
Según …..las placas de agar Leche se utilizan para proporcionar un medio nutritivo para el cultivo de microorganismos. Una vez preparado, el agar puede disponerse en placas con una población de microorganismos que comprueben su capacidad de digerir la proteína caseína. La caseína esuna proteína grande no soluble que se halla en la leche descremada. Al ser digerida por las enzimas de un organismo, la caseína se descompone en pequeños aminoácidos y péptidos. En las zonas de la placa de agar donde se haya descompuesto la caseína, aparecerán manchas claras. El agar de leche descremada es un medio relativamente simple y poco costoso para llevar a cabo experimentos
Como objetivode la práctica fue aplicar los principios generales sobre medios de cultivo diferenciales con los cuales se pueden distinguir diferencias metabólicas de diversas especies o géneros de bacterias o microorganismos, para lo cual se emplearon medios de cultivo para el aislamiento de bacterias en una muestra de leche cruda utilizando Agar McConkey y Agar Leche.

MATERIALS Y METODOS
Muestra
Para los...