soluciones buffer

PREPARACION Y VALORACION DE SOLUCION BUFFER
I. GENERALIDADES
Una solución Buffer o Tampón es la mezcla en equilibrio del par ácido base conjugado, que tiene la propiedad de oponerse a los cambiosde pH cuando se le agrega pequeñas cantidades de un ácido o una base.
Los fluidos celulares presentan soluciones tampón naturales como el fosfato, proteínas, ácido carbónico, que son los encargadosde mantener el pH fisiológico. Los estudios Bioquímicos in vitro utilizan soluciones buffer cuyos pKa están entre 6 y 8 por ser el rango óptimo de PH en la que se realizan la mayoría delas reaccionesbiológicas.

II. OBJETIVOS
1. Preparación de una solución Buffer, calculando las cantidades de ácido y base conjugada.
2. Demostrar in vitro la acción amortiguadora de las soluciones Buffer.III. MATERIALES Y REACTIVOS
Materiales.
Potenciómetro digital
Filola de 100ml
Vaso precipitado 250ml (4)
Erlenmeyer (6)
Bureta con soporte
Pipetas de 5 ó 10 ml
Baguetas (2)
PizetasBalanza

Espátula
Reactivos.
Fosfato monosódico


Fosfato disódico

Indicador fenolftaleína al 1%
Indicador rojo de metileno al 0.1%
Ácido clorhídrico 0.1M
Hidróxido de sodio 0.1M
IV.PROCEDIMIENTO
1. Preparar 100 ml de solución buffer de fosfato 0.1M de pH 8,2, usando fosfato monosódico y fosfato disódico.
Cálculos

Datos.-
A=Fosfato monosódico (NaH2PO4) PM= 120
B=fosfatodisódico (Na2HPO4) PM= 142
PKa=7,2
pH=8,2

Molaridad del Buffer = 0.1M aportado NaH2PO4 (fosfato monosódico)
Y Na2HPO4 (fosfato disódico)

Dónde:A+B= 0,1 (1)
A= 0,1 – B (2)
B= 0,1 – A (3)
Para calcular el valor de A o B se recure a la ecuación de Henderson – Hasselbalch.
pH = pKa + log B/A
8,2 = 7,2 +log B/A
8,2 –7,2 = log B/A
Antilog – 1 = B/A
B/A = 10

Despejando B.
B = 10A
Reemplazando en la ecuación (3)
10A=0,1 – A
10A+ A = 0,1
A= 0,1/11
A= 0,0091
A=0,0091 M
El valor de B será
B=0,1 -...