“TÉCNICAS BÁSICAS PARA EL CULTIVO DE MICROORGANISMOS: SIEMBRA Y ESTUDIO DE BACTERIAS”

PRÁCTICA Núm. 3
“TÉCNICAS BÁSICAS PARA EL CULTIVO DE MICROORGANISMOS: SIEMBRA Y ESTUDIO DE BACTERIAS”

INTRODUCCIÓN.

Para aislar una especie bacteriana y diferenciarla de aquellas otras con las que pudiera confundirse morfológicamente, es preciso obtener cultivos, que por características macro y microscópicas y por el estudio de las propiedades biológicas del microorganismo, nos permitaestablecer su identidad. Estos cultivos se llevan a cabo sobre sustratos óptimos para el desarrollo bacteriano.
Para efectuar el estudio de los microorganismos, se han diseñado diversos métodos que permiten cultivarlos bajo condicione artificiales, en los que es posible cultivarlos bajo condiciones experimentales y manejar un solo tipo de microorganismo. Una de las técnicas más usadas en ellaboratorio de microbiología consiste en transferir una muestra microbiológica de un ambiente determinado a un medio de cultivo, lo que permite obtener cultivos microbianos. Al efectuar este procedimiento, es necesario considerar que en el área de trabajo, existen muchos otros microorganismos; debido a esto, es necesario tomar precauciones para impedir que éstos penetren y contaminen los cultivos enestudio. Por otra parte, para considerar no sólo el aspecto nutricional, sino también las condiciones ambientales de su hábitat natural, por lo que en el medio de cultivo se debe ajustar el pH y concentración de sales y durante la incubación condiciones tales como la temperatura, aireación la luminosidad.

La aplicación de estos procedimientos ha permitido propagar a los microorganismos encultivos mixtos, así como su aislamiento y la obtención de cultivos puros, facilitando de este modo, el estudio, caracterización, aplicación y control de los mismos. La forma de sembrarlos y cultivarlos depende del tipo de microorganismo y propósito específico del estudio.

OBJETIVOS:
Aplicar la técnica adecuada para preparar el área de trabajo y evitar contaminaciones.
Organizar el material para sufácil manejo e identificación.
Manipular adecuadamente los cultivos puros.
Seleccionar y aplicar las técnicas de siembra adecuadas para alcanzar propósitos específicos.
Identificar y describir correctamente las características culturales y microscópicas de algunas bacterias.
Organizar e interpretar los resultados del estudio macroscópico y microscópico de bacterias.



GENERALIDADES.
Lasiembra de las muestras obtenidas de la cavidad bucal en medios de cultivo selectivos, es el procedimiento más adecuado para establecer la etiología de los procesos infecciosos. No obstante, es conveniente indicar que se trata de una metodología compleja, laboriosa y que necesita de personal especializado. Es conveniente señalar que el aislamiento y purificación de algunos microorganismosanaerobios no es fácil de obtener; sin embargo, en los últimos años se han desarrollado medios selectivos y suplementos específicos con los que puede favorecerse el aislamiento de anaerobios de interés en la cavidad bucal.
La identificación de los microorganismos aislados y purificados, se inicia con el examen microscópico previa coloración y la observación macroscópica de las colonias, seguido delanálisis a través de pruebas bioquímicas convencionales o por pruebas rápidas que incluyen sistemas bioquímicos y enzimáticos manuales o automatizados, que permiten la identificación definitiva.
Cultivar un microorganismo significa promover intencionalmente el desarrollo de éste en medios de cultivo y condiciones de laboratorio controladas. La población de microorganismos desarrollada en un medio sedenomina cultivo. Cuando éste contiene una sola especie de microorganismo, se denomina cultivo puro o axénico, cuando contiene más de una especie de microorganismos se denomina cultivo mixto. Un cultivo tipo contiene una especie conocida de microorganismos y es conservada en el laboratorio para realizar diversos ensayos y estudios.

Un cultivo axénico consiste en una sola especie microbiana,...