Técnicas de siembra para hongos y bacterias

PRACTICA N° 5
TÉCNICAS DE SIEMBRA PARA HONGOS Y BACTERIAS
Álvarez, G. 511002, Rios, O. 411058, Vargas, A. 510564, Lara, P. 511035
Facultad de ingeniería y administración
Universidad Nacional De Colombia – Sede Palmira

RESUMEN
Para estudiar las características tanto de hongos como de bacterias se recurre a las técnicas de siembra; las cuales permiten aislar y mantener, en un cultivopuro, un microorganismo objeto de estudio. En la práctica se realizaron las técnicas de siembra en cajas de Petri por agotamiento, siembra en cuadrantes, siembra masiva y siembra por punción; las cuales dieron como resultado colonias aisladas en las dos primeras y un subcultivo para el incremento del inoculo en las dos últimas. De igual forma se realizaron las técnicas de siembra en tubos porestría simple, por picadura, siembra mixta y en medio liquido; en los cuales se obtuvo un crecimiento del inoculo. La práctica se realizó con el objetivo de ejecutar las diferentes técnicas de siembra y, del mismo modo, relacionarse con cada una de ellas y aprender a diferenciar con cuales microorganismos y con qué objetivos se aplican.

Palabras Claves: aislamiento, cultivo puro, microorganismo,estría, punción.

INTRODUCCIÓN

Los microorganismos, al ser ubicuos, tienden a encontrarse diversamente y prácticamente en todas partes. Debido a lo anterior, para poder estudiar un microorganismo determinado en detalle es necesario, por medio de una siembra, aislarlo de una población microbiana natural mixta, mantenerlo y hacer posible su reproducción en un ambiente artificial (denominado mediode cultivo) al que se impide el acceso de otros microorganismos externos. Las técnicas de siembra más comunes se realizan en cajas de Petri y en tubos de ensayo, aunque suelen utilizarse también matraces según la necesidad (Stanier y Villanueva, 2005).

Las siembras en placa consisten en separar e inmovilizar un organismo particular para que se desarrolle sobre un medio nutritivo solidificadopor agar en una caja de Petri (Tortora et al., 2007), entre ellas están la técnica de agotamiento y la siembra en cuadrantes cuyo objetivo es obtener colonias totalmente separadas constituidas por bacterias del mismo tipo (Prats, 2005); entre las anteriores también se encuentran las técnicas de siembra masiva y por punción las cuales cumplen la función de incrementar el inoculo o hacer unsubcultivo de este (Rojas, 2011).

La práctica se realizó con el objetivo de conocer e implementar diferentes métodos de siembra para hongos y bacterias, según sea su finalidad.

MATERIALES Y MÉTODOS
Se utilizó un asa bacteriológica, un asa micología, tres cajas Petri con agar nutritivo y una con agar Sabouraud, cuatro tubos de agar inclinado, un tubo de agar recto, un tubo de ensayo con caldonutritivo, dos mecheros, un hisopo y las muestras de bacterias y hongos a partir del cultivo “stock”.
Técnicas de siembra en cajas de Petri
Método de Agotamiento (Aislamiento): Se realizó una estría en una parte de la caja con un asa bacteriológica cargada, posteriormente se flameo el asa y a partir de la anterior estría se realizó otra, arrastrando los microorganismos de esta a un área próxima aella. Se repitió este proceso dos veces flameando y enfriando el asa cada vez que se terminaba una estría.

Método de siembra en cuadrantes: Se marcó la caja de Petri dividiéndola en 4 partes iguales con un marcador, y con el asa bacteriológica previamente esterilizada, se tomó una muestra de la bacteria y se realizaron estrías en los 4 cuadrantes, de forma continua sin esterilizar el asa,procurando que no se crucen las estrías entre cuadrantes.
Método de siembra masiva: Se pasó un hisopo cargado con la muestra de la bacteria, en distintas direcciones sobre la superficie del agar, incluyendo el borde.
Método de punción: Se tomó parte de la muestra del hongo conservado con un asa micológica previamente esterilizada, y se ejecutaron varias picaduras suaves en un agar Sabouraud...