Tecinicas inmunologicas
Páginas: 23 (5670 palabras)
Publicado: 2 de junio de 2015
INTRODUCCION
La reacción antígeno-anticuerpo (Ag-Ac) es una unión molecular entre el epitopo (antígeno) y la región hipervariable del anticuerpo, mediante interacciones no covalentes o secundarias. Estas uniones son débiles tales como: puentes de hidrógeno, fuerzas iónicas y fuerzas de van der Waals.
Estas fuerzas sólo se convierten en agentes de unión efectivos cuando ocurren a distanciasmuy cercanas. Las interacciones hidrofóbicas intervienen también y constituyen el 50% de la fuerza total.
De tal manera que debe ocurrir una combinación de moléculas complementarias entre el sitio de unión del anticuerpo y el determinante antigénico o epitopo. Mientras más se complementan las configuraciones moleculares, más uniones secundarias se forman entre el antígeno y el anticuerpo, y es másdifícil que ese complejo sea alterado por fuerzas tales como la agitación térmica.
La asociación Ag-Ac está determinada por la ley de acción de masas, es reversible y está definida por una constante de equilibrio K = AcAg/(Ac)(Ag).
La velocidad de la reacción depende de tres factores: la afinidad, la avidez y la especificidad: (Aunque estos dos términos a menudo son usados indistintamente, no sonexactamente lo mismo).
La avidez se refiere a la fuerza de unión mostrada por los anticuerpos a un antígeno complejo (antígeno que contiene una variedad de epitopos).
La afinidad se refiere a la fuerza de unión entre el anticuerpo y un epitopo; es la suma de las fuerzas de atracción sobre las de repulsión.
En la unión Ag-Ac ocurren dos reacciones: la reacción primaria y la secundaria. Lareacción primaria es la formación del complejo Ag-Ac y la secundaria es la evidencia de esos complejos mediante la observación de un fenómeno, el cual depende de la naturaleza del antígeno, las propiedades de los anticuerpos y la presencia de otros factores en el medio de reacción.
La mayor aplicación de estas reacciones in vitro son las pruebas serológicas. Son llamadas así porque es el suero el vehículohabitual de los anticuerpos. Sin embargo, pueden realizarse en otros fluidos corporales tales como plasma, orina o líquido cefalorraquídeo, en busca de antígenos o anticuerpos específicos.
Una prueba serológica para un antígeno específico idealmente es realizada usando un reactivo de anticuerpo monoespecífico (que contenga anticuerpos reactivos con una sola clase de epitopo). No siempre esposible obtener anticuerpos monoespecíficos, por lo que en estos casos son usados los antisueros polivalentes (que contienen anticuerpos de más de una especificidad.
Existen dos términos importantes en los métodos serológicos:
Idealmente, las pruebas serológicas debieran ser 100% específicas y 100% sensibles. La
especificidad se refiere a la relativa ausencia de reacción cruzada de los anticuerpos consustancias que están químicamente relacionadas (pero no idénticas) al antígeno contra el que se produjeron, y la sensibilidad se refiere a la cantidad más pequeña de sustancia desconocida (antígeno o anticuerpo) que pueda ser detectada por la prueba. Si una muestra reacciona cruzadamente con sustancias naturales diferentes a las que se intentan determinar en la prueba, decimos que se obtiene unresultado biológico falso positivo (BFP). Si una prueba serológica no detecta la sustancia que se está buscando y que realmente sí está contenida en la muestra, se obtiene un resultado biológico falso negativo (BFN). Si en cien muestras de suero que contienen todos los mismos antígenos, la prueba produce cinco BFN, se dice que tiene una sensibilidad del 95%.
Existen otros factores, tales como loserrores técnicos, que producen resultados falsos positivos y negativos, pero no son considerados de origen biológico.
https://microinmuno.files.wordpress.com/2011/07/inmunodifusic3b3n-radial.pdf
OBJETIVOS
- Distinguir las reacciones Ag-Ac primaria y secundaria.
- Conocer los factores que influyen en la interacción Ag-Ac en las reacciones secundarias.
- Comprender los fundamentos de las...
La reacción antígeno-anticuerpo (Ag-Ac) es una unión molecular entre el epitopo (antígeno) y la región hipervariable del anticuerpo, mediante interacciones no covalentes o secundarias. Estas uniones son débiles tales como: puentes de hidrógeno, fuerzas iónicas y fuerzas de van der Waals.
Estas fuerzas sólo se convierten en agentes de unión efectivos cuando ocurren a distanciasmuy cercanas. Las interacciones hidrofóbicas intervienen también y constituyen el 50% de la fuerza total.
De tal manera que debe ocurrir una combinación de moléculas complementarias entre el sitio de unión del anticuerpo y el determinante antigénico o epitopo. Mientras más se complementan las configuraciones moleculares, más uniones secundarias se forman entre el antígeno y el anticuerpo, y es másdifícil que ese complejo sea alterado por fuerzas tales como la agitación térmica.
La asociación Ag-Ac está determinada por la ley de acción de masas, es reversible y está definida por una constante de equilibrio K = AcAg/(Ac)(Ag).
La velocidad de la reacción depende de tres factores: la afinidad, la avidez y la especificidad: (Aunque estos dos términos a menudo son usados indistintamente, no sonexactamente lo mismo).
La avidez se refiere a la fuerza de unión mostrada por los anticuerpos a un antígeno complejo (antígeno que contiene una variedad de epitopos).
La afinidad se refiere a la fuerza de unión entre el anticuerpo y un epitopo; es la suma de las fuerzas de atracción sobre las de repulsión.
En la unión Ag-Ac ocurren dos reacciones: la reacción primaria y la secundaria. Lareacción primaria es la formación del complejo Ag-Ac y la secundaria es la evidencia de esos complejos mediante la observación de un fenómeno, el cual depende de la naturaleza del antígeno, las propiedades de los anticuerpos y la presencia de otros factores en el medio de reacción.
La mayor aplicación de estas reacciones in vitro son las pruebas serológicas. Son llamadas así porque es el suero el vehículohabitual de los anticuerpos. Sin embargo, pueden realizarse en otros fluidos corporales tales como plasma, orina o líquido cefalorraquídeo, en busca de antígenos o anticuerpos específicos.
Una prueba serológica para un antígeno específico idealmente es realizada usando un reactivo de anticuerpo monoespecífico (que contenga anticuerpos reactivos con una sola clase de epitopo). No siempre esposible obtener anticuerpos monoespecíficos, por lo que en estos casos son usados los antisueros polivalentes (que contienen anticuerpos de más de una especificidad.
Existen dos términos importantes en los métodos serológicos:
Idealmente, las pruebas serológicas debieran ser 100% específicas y 100% sensibles. La
especificidad se refiere a la relativa ausencia de reacción cruzada de los anticuerpos consustancias que están químicamente relacionadas (pero no idénticas) al antígeno contra el que se produjeron, y la sensibilidad se refiere a la cantidad más pequeña de sustancia desconocida (antígeno o anticuerpo) que pueda ser detectada por la prueba. Si una muestra reacciona cruzadamente con sustancias naturales diferentes a las que se intentan determinar en la prueba, decimos que se obtiene unresultado biológico falso positivo (BFP). Si una prueba serológica no detecta la sustancia que se está buscando y que realmente sí está contenida en la muestra, se obtiene un resultado biológico falso negativo (BFN). Si en cien muestras de suero que contienen todos los mismos antígenos, la prueba produce cinco BFN, se dice que tiene una sensibilidad del 95%.
Existen otros factores, tales como loserrores técnicos, que producen resultados falsos positivos y negativos, pero no son considerados de origen biológico.
https://microinmuno.files.wordpress.com/2011/07/inmunodifusic3b3n-radial.pdf
OBJETIVOS
- Distinguir las reacciones Ag-Ac primaria y secundaria.
- Conocer los factores que influyen en la interacción Ag-Ac en las reacciones secundarias.
- Comprender los fundamentos de las...
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