Tecnicas adn recombinante

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TÉCNICAS DEL ADN RECOMBINANTE
GINA JENNIFERCOLORADO G.
MAESTRÍA CIENCIAS BIOMÉDICAS UNIVALLE 2011

TÉCNICAS DEL ADN RECOMBINANTE
En la actualidad es posible:
 Separar regiones de DNA
Obtener un

numero ilimitado de regiones

 Determinar la secuencia de sus nucleótidos


Modificar y/o transferir un gen

TÉCNICAS DEL ADN RECOMBINANTE
 Rotura

específica del ADN

  Secuenciación rápida Hibridación Clonación

Ingeniería genética

TÉCNICAS DEL ADN RECOMBINANTE


Endonucleasas de restricción

Enzimas que reconocen un sitio específico en la molécula deADN y cortan en este punto denominado diana de restricción Cada enzima reconoce una secuencia específica , originando fragmentos de ADN denominados fragmentos de restricción

TÉCNICAS DEL ADNRECOMBINANTE
 Endonucleasas

de restricción

Propiedades útiles en la tecnología del ADN recombinante: Cortan en el ADN en un tamaño de un fragmento adecuado para la clonación de 4 a 8 nucleótidos.•

Realizan cortes escalonados que crean una sola fila pegajosa, extremos conducentes a la formación del ADN recombinante.


Endonucleasas de restricción
1

Endonucleasas de restriccióntipo II

Móleculas de ADN Recombinante
Las moléculas de ADN producidas mediantes la unión de dos o mas fragmentos de ADN

TECNICAS ADN RECOMBINANTE
Mapa de restricción: Refleja la disposiciónde secuencias específicas en la región elegida para el corte.

TECNICAS ADN RECOMBINANTE
 Vectores

de Clonación: Es un sistema genético replicante, portadores de ADN.

Técnicas ADNRecombinante
Vector Descripción
Límite de tamaño del fragmento Mayor Aplicación Plásmido Subclonación y manipulación posterior. Moléculas de ADN circular. Se replican independientemente del cromosomabacteriano, ya que tienen su propio origen de replicación. Hasta 10.000 pb Clonación de DNA Ensayos de expresión

Bacteriófago lamda

Cubierta proteica o cápside, en cuyo interior está material...
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