Tecnicas Especializadas Para Cultivo Invitro

TECNICAS MAS ESPECIALIZADAS

CELULAS INMOVILIZADAS
Ésta es una alternativa que ha mostrado en muchos casos la estimulación del metabolismo secundario, debido probablemente a una tasa decrecimiento más lenta que favorece un mayor flujo de nutrientes y energía hacia este metabolismo, un mayor contacto célula-célula y un mayor grado de diferenciación, haciendo que el ambiente físico-químico seamás parecido al de la planta. Las células inmovilizadas presentan una mayor limitación a la transferencia de masa, debido a la resistencia aportada por el soporte; además, se ha reportado lainducción de cambios morfológicos y fisiológicos, que pueden estimular no sólo la producción, sino también la liberación de metabolitos secundarios al medio, posiblemente por la permeabilización de la membranacelular.
La utilización de sistemas con células inmovilizadas presenta la ventaja de mantener retenido el biocatalizador, permitiendo su reutilización y la operación del proceso de manera continua,usando altas tasas de dilución sin que ocurra lavado celular. Adicionalmente, cuando el metabolito es liberado por la célula al medio, se ven simplificados los procesos de purificación de losmetabolitos de interés, reduciendo el costo del proceso. La matriz de inmovilización provee una mayor protección a las células, impidiendo que éstas tengan contacto directo con el fluido y con dispositivosmecánicos dentro del reactor, reduciendo de esta forma el estrés de corte al que son sometidas y por tanto manteniendo la actividad catalítica por más tiempo, a altas tasas de aireación y agitación. Laproductividad puede incrementarse mediante el mantenimiento de altas densidades celulares, la inducción de la liberación del producto y la eliminación de la fase de crecimiento, que en el caso decélulas vegetales representa gran parte del tiempo del proceso. Sin embargo, debe tenerse en cuenta que la viabilidad de las células puede verse comprometida, que el metabolito de interés no debe estar...