Trasplande De Plantas En Cultivo Invitro

PRÁCTICA # 2 TRASPLANTE DE PLANTA EN CULTIVO IN VITRO
elaboró: Prof. Héctor Islas Huitrón 13-sep-2011

INTRODUCCIÓN

Para el cultivo in vitro de plantas, se siguen varias técnicas como la preparación del medio de cultivo, la esterilización, la desinfestación y la siembra. La preparación del medio de cultivo, es a base de una solución de macro y micronutrientes, con compuestosorgánicos, entre los cuales está la sacarosa, vitaminas y hormonas o reguladores de crecimiento, como las auxinas, citocininas. La esterilización es la eliminación con calor y presión de los posibles gérmenes en los medios de cultivo y otros materiales necesarios, aunque también se pueden flamear los materiales para lograr lo mismo. En el caso de la desinfestación o desinfección, la técnica consisteen poner en contacto el material vegetal con una solución jabón, alcohol y cloro para eliminar gérmenes. También funciona como un proceso de escarificación química, ya que lava los compuestos presentes en la testa de las semillas que pudieran impedir la entrada de agua para su germinación. La siembra del material desinfectado es el siguiente proceso, el cual se lleva a cabo en un área asépticapara evitar la contaminación del medio de cultivo. La campana de flujo laminar es un instrumento importante para el cultivo in vitro, la cual es una mesa cerrada, a modo de una pequeña sala de cirugía, por la que se hace fluir aire filtrado de partículas. Sin embargo, también se puede obtener un ambiente aséptico en una mesa de laboratorio con el uso de mecheros.
Para tener un primeracercamiento a dichas técnicas, los alumnos pueden practicar el trasplante de ejemplares que ya se habían obtenido en anteriores experimentos, sobre todo a los que ya les hace falta la renovación del medio de cultivo. Con el trasplante tienen la oportunidad de practicas la siembra y la esterilización por flameo de las pinzas y el bisturí, así como la preparación del área de trabajo aséptica y lospormenores del propio trasplante.

Objetivos

- Conocer y practicar las técnicas de trasplante y esterilización de plantas cultivadas in vitro.

Cuestionario guía

1.- ¿Cuáles son las principales fuentes de contaminación de los cultivos vegetales in vitro?
2.- ¿Qué importancia tiene el trasplante en las técnicas de micropropagación de plantas?
3.- ¿Cuáles son los cuidados necesariosdurante la siembra en el cultivo in vitro?

MATERIALES:

|Material esterilizado: |toalla para las manos |
|1 pinzas de disección |2 trapos limpios |
|2 cajas de Petri|1 rollo de 4 cm de plástico adherente |
|1 vaso de precipitados de 100 ml |Botella nueva de cloro |
|1 frasco de 250 ml |1 cc de detergente en polvo |
|3 vasos de precipitados de 50 ml|Botella nueva de alcohol etílico |
|frasco con medio de cultivo |agar bacteriológico |
| |agua destilada estéril |
|Material individual y por equipo:|dos mecheros Bunsen |
|3 jeringas esterilizadas de 5 ml |atomizador con alcohol |
|plantas cultivadas in vitro de Mammillaria gracilis, M. duwei y |encendedor |
|M. plumosa...