Tecnicas Histologicas

TÉCNICA HISTOLÓGICA
CÉSAR EDUARDO MONTALVO ARENAS
Agosto de 2010.
INTRODUCCIÓN.
Parece factible que, si deseamos estudiar una célula o una
asociación de ellas, para conocer su estructura morfológica
microscópica y deducir, en lo posible sus funciones, bastaría
examinarlas a través de los instrumentos que amplían
imágenes de los objetos observados (microscopios fotónicos
y electrónicos);este procedimiento no es factible de
realizar; al intentar hacerlo se presentan serias dificultades
en la manipulación de los especimenes y el inicio de los
procesos propios de desarreglo molecular (autólisis) y
celular que suelen presentarse después que las células y los
tejidos abandonan su hábitat natural. Por lo tanto, es
necesario utilizar una serie de procedimientos y artificios
quenos permitan describir, comprender y analizar la
estructura microscópica de las células, tejidos y órganos.
Se denomina TÉCNICA HISTOLOGICA al conjunto de
procedimientos aplicados a un material biológico (animal o
vegetal) con la finalidad de prepararlo y conferirle las
condiciones óptimas para poder observar, examinar y
analizar sus componentes morfológicos a través de los
microscopiosfotónicos y electrónicos.
PROCEDIMIENTOS INMEDIATOS O VITALES
Permiten la observación y el estudio de protozoarios, células
sanguíneas, células descamadas o disociadas, células en
cultivo de tejidos; estructuras muy delgadas y translúcidas
como la membrana peritoneal de animales pequeños o
epidermis de vegetales, granos de polen etc. suspendidas en
los líquidos de su hábitat natural o soluciónsalina
balanceada. Para una observación óptima suele utilizarse
tipos especiales de microscopios fotónicos como el de
campo oscuro o el de contraste de fases: observación al
estado fresco.
En ciertos casos, cuando se requiera destacar alguna
estructura celular o tisular se pueden emplear colorantes
inocuos para la vida de las células, no modifican la
estructura de ellas ni interfieren ensus funciones. A este
procedimiento se le conoce como coloración vital.
Para el estudio de las manifestaciones vitales de las
muestras suelen emplearse una serie de microinstrumentos
que facilitan la introducción, al interior de las células, de
sustancias o la extracción de ciertos componentes mediante
microinyectores,
micropipetas,
microelectrodos
o
instrumentos que emiten haces sumamentedelgado de
radiaciones de alta energía (rayos laser).

Fig Tec. de tinción: Micromanipulación mecanica (microelectrodos
que a traviesasn la emembran celular)

COLORACIÓN VITAL Puede ser de dos tipos:
1. Coloración intravital, consiste en la administración de
colorantes vitales a través de las vías digestiva o
intratraqueal; mediante inyecciones sanguíneas,
linfáticas, subcutánea, ointraperitoneal. Las soluciones
de uso más frecuente son: tinta china, carmín de litio,
azul tripan (partículas colorantes que demuestran la
capacidad fagocítica).
2.

Coloración supravital, En este procedimiento se
emplean colorantes que se aplican a células o tejidos
provenientes de organismos vivos. Se demuestran:
mitocondrias con el verde de Jano, los gránulos de las
células cebadas conel rojo neutro, la sustancia
granulofilamentosa de los reticulocitos con el azul
brillante de cresyl, ramificaciones nerviosas con el
azul de metileno; o el ADN y el ARN de las células con
naranja de acridina (empleando el microscopio de
fluorescencia).

Fig Tec. de tinción 1: Tinción supervital de macrofagos de tejido
conectivo por agregado de Carmin de litio a una preparación de TejidoVivo.

PROCEDIMIENTOS MEDIATOS O POSTVITALES
Tienen por finalidad preparar células, tejidos y órganos
procedentes de seres en los que los procesos vitales se han
detenido y es necesario conservar la estructura que tenían en
vida.
De manera general, para alcanzar este objetivo es necesario
realizar los siguientes pasos:
- Toma de la muestra
- Fijación
- Inclusión
- Microtomía
-...