TEST DE LA FENOLFTALEÍNA

PRUEBA DE KASTLE-MEYER
(TEST DE LA FENOLFTALEÍNA)

La prueba o test de Kastle Meyer es una prueba
forense preliminar, descrita por primera vez en
1903, en la que se usa el indicador químico
Fenolftaleína. Es básicamente una prueba
colorimétrica.
Se fundamenta en la actividad, similar a una
peroxidasa de la hemoglobina en la sangre, para
catalizar la oxidación de la fenolftalina (laforma
reducida incolora de la fenolftaleína) a
fenolftaleína, que es visible por su color rosado
brillante.
La fenolftaleína no es soluble en agua, con lo que
normalmente se disuelve en alcohol para su uso en
experimentos.
Es un ácido débil que pierde cationes en solución. La
molécula de fenolftaleína es incolora, en cambio el
anión derivado es de color rosa.
Cuando se agrega una base, lafenolftaleína pierde cationes formándose la fenolftaleína y
haciendo que tome coloración rosa.
Es decir, la fenolftaleína es un indicador de pH que en soluciones ácidas permanece incoloro, pero
en presencia de bases se torna rosa o violeta: utiliza el reactivo conocido con el nombre de KastleMeyer.

Método.
Una muestra que se presume contenga sangre es
recolectada con una torunda o con unhisopo.
Se le agrega una gota de reactivo fenolftalina, y
después de unos segundos, se aplica una gota de
peróxido de hidrógeno a la torunda/hisopo. Si la
torunda se vuelve rosada rápidamente, se dice
que la prueba preliminar de sangre es positiva.
Si se ha de esperar más de 30 segundos, resultará
en que muchas torundas/hisopos se vuelven
rosadas naturalmente, puesto que se oxidarán
por sucuenta en el aire.
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PRUEBA DE KASTLE-MEYER
Victor Manuel Placier Jiménez.
Perito en Criminalística.
Opcionalmente, la torunda/hisopo puede ser
tratada primero con una gota de etanol, con el fin
de lisar las células presentes, y ganar sensibilidad y
especificidad.
Esta prueba no es destructiva de la muestra,que
puede guardarse y ser usada en otras pruebas en
el laboratorio; sin embargo, pocos laboratorios
usarían la misma torunda usada en la prueba de
Kastle-Meyer en cualquier otra prueba, optando
en su lugar por usar una nueva torunda de la
muestra original.
Si al aplicar unas gotas del reactivo, aparece color rosa-violeta, presuntamente es sangre. Si
continúa incoloro, es negativo absoluto.La prueba de Kastle Meyer tiene la misma
reacción con la sangre humana que con cualquier
otra sangre en hemoglobina.
IMPORTANTE!!
Se advierte que esto solo es un ensayo
presuntivo, no debe concluir aquí la verificación,
debe llevarse al laboratorio y realizar una prueba
confirmatoria para concluir definitivamente de
que especie proviene la sangre.

LIMITACIONES.
Aunque se hareportado que la prueba de Kastle-Meyer es capaz de detectar diluciones de sangre
hasta de 1:107, hay un número de limitaciones importantes para el test. La prueba dará un
resultado falso positivo en la presencia de peroxidasas vegetales, como los encontrados en la cola
de caballo, brócoli, coliflor, etc.
Adicionalmente, otras especies oxidantes en la muestra causarán un falso positivo. Oxidantesquímicos como las sales de cobre o de níquel también causarán que el reactivo de Kastle-Meyer se
vuelva rosado antes de la adición del peróxido de hidrógeno, por lo que es de vital importancia
agregar el reactivo primero, esperar unos cuantos segundos, y luego agregar el peróxido de
hidrógeno.
La prueba de Kastle Meyer tiene la misma reacción con la sangre humana que con cualquier otra
sangrebasada en hemoglobina, así que debe realizarse una prueba confirmatoria, como la prueba
de Ouchterlony para concluir definitivamente de qué especie proviene la sangre.
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Victor Manuel Placier Jiménez.
Perito en Criminalística.
Las pruebas catalíticas de color son muy
sensibles, pero no...