TINCIÓN (BAAR)
La tinción de Ziehl-Neelsen es una coloración diferencial útil en la identificación de
Micobacterias, aunque no permite la diferenciación de distintas especies. La característica deácido-resistencia de estos microorganismos hace de esta coloración un método rápido en el diagnóstico, presuntivo, de infección micobacteriana. Las micobacterias son coloreadas de rojo por la Fucsinay retienen el color a pesar de la acción del ácido y del alcohol.
1. -PORTA OBJETOS LIMPIO
2. -IDENTIFICAR. INICIALES DEL PACIENTE, CÓDIGO NUMÉRICO O ALFA NUMERICO
3. -FROTIS. RECTANGULAR O ENFORMA CIRCULAR CON UN AREA APROXIMADO DE LA 4 CM.
4. -FIJACION . SIEMPRE CON LA LLAMA DEL MECHERO, SIN EXPONER AL CALOR EXCESIVO A LAS BACTERIAS.
5. -COLORANTE PRIMARIO . CUBRIR CON FUCSINA TODA LAPLACA, CALENTAR EN FORMA INTERMITENTE HASTA LA EMISIÓN DE TRES VAPORES
6.- LAVAR CON AGUA CORRIENTE
7.- DECOLORAR CON ALCOHOL ACIDO (ALCOHOL DE 95 MAS ACIDO CLORHIDRICOO ACIDO SULFURICO Y AGUADESTILADA ) 30 SEG A 1 MIN.
8.- LAVAR CON AGUA CORRIENTE.
9. -COLORANTE SECUNDARIO . CUBRIR CON AZUL DE METILENO TODA LA PLACA, DEJAR ACTUAR POR EL LAPSO DE 30 SEG A 3 MINUTOS. SE TEÑIRÁ EL FONDO MAS ELRESTO DE ESPUTO COMO CÉLULAS DEL ÁRBOL BRONQUIAL Y MOCO
10. -LAVAR CON AGUA CORRIENTE.
11.- DEJAR SECAR AL AMBIENTE. SE PREFIERE NO ACERCAR AL CALOR DEL MECHERO, SI SE DESEA RAPIDEZ SE PUEDE SECAR CONAGUA ABSORBENTE.
12.- OBSERVAR AL MICROSCOPIO CON OBJETIVO DE INMERSION.
Las paredes celulares de ciertas bacterias contienen ácidos grasos (ácidos micólicos) de cadena larga (50 a 90 átomos decarbono) que les confieren la propiedad de resistir la decoloracíón con alcohol-ácido, después de la tinción con colorantes básicos. Por esto se denominan ácido-alcohol resistentes. Las micobacteriascomo Mycobacterium tuberculosis y M. marinum se caracterizan por sus propiedades de ácido-alcohol resistencia. La coloración clásica de Ziehl-Neelsen requiere calentamiento para que el colorante...
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