Tincion de wright

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  • Publicado : 26 de octubre de 2010
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METÓDICA:
Extracto de las técnicas de tinción hematológicas de la casa Panreac.
FUNDAMENTO:
El colorante utilizado es una solución de eosina y una mezcla de azul de metileno (del50% al 75%) y azur B (del 10% al 25%) junto con otros derivados del alcohol metílico.
Dada la presencia de metanol en la composición, no es necesario un paso previo de fijación antes dela coloración.
Solo si se van a guardar las extensiones sin teñir de un día para otro precederemos a su fijación para evitar el deterioro del frotis.
MATERIAL NECESARIO:
·       Microscopio óptico
·        Cristalizador
·        Puentes de tinción
·        Pipetas Pasteur con chupete
·        Frasco lavador
·        Guantes
·        Tubos de ensayoREACTIVOS:
·        Solución de eosina-azul de metileno según Wright
·        Solución tampón pH 7,2
·        Aceite de inmersión

MUESTRA:
Sangre capilar fresca o venosaanticoagulada. Los anticoagulantes más adecuados son la heparina y el EDTA. 

TÉCNICA:
Realizar un frotis sanguíneo muy fino. Dejar secar al aire.

Sobre la extensión colocada horizontalmenteen el puente de tinción verter un ml de eosina – azul de metileno.

Dejamos actuar  un minuto y lavamos con solución tampón ph 7,2.

Dejamos escurrir y secar en posición vertical.Inmediatamente antes de su empleo y en un tubo de ensayo diluimos 0,5 ml de eosina-azul de metileno con 0,5 ml de solución tampón pH 7,2.

Mezclamos bien y cubrimos con estadilución la extensión. 
Teñimos durante 3-5 minutos y lavamos con agua del grifo.

Volvemos a lavar con solución tampón pH 7,2.

Dejamos escurrir y secar en posición vertical.LECTURA DE RESULTADOS:
Depositamos una gota de aceite de inmersión y observamos con el objetivo de 100x.

Las células se observan coloreadas de la misma manera que con la tinción de Giemsa
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