Titulo

Tema 13 Replicación
Replicación
Transcripción Traducción

DNA

RNA

Proteínas

-Características Generales -Enzimas implicadas: Características -Proceso de Replicación: 1-Iniciación 2-Elongación 3-Terminación -Replicación en Eucariotas

Tema 12: Replicación y Reparación

Replicación del DNA
La transferencia de la información genética de una generación a otra requiere la copiaexacta de la información genética incluida en el DNA.

5´

A C T A A T G G G G A T C C 3´ T G A T T A C C C C T A G G A C T A A T G G G G A T C C 3´ T G A T T A C C C C T A G G A C T A A T G G G G A T C C T A C C C C T A G G

3´ 5´ 3´ 5´

5´

3´

T G A T

5´

Tema 12: Replicación y Reparación

Características generales de la replicación del DNA
El mecanismo de replicación del DNAfue sugerido a partir del modelo estructural del DNA propuesto por Watson y Crick en 1953. La replicación del DNA implica la separación de ambas cadenas para permitir que sean copiadas

La replicación del DNA: La replicación del DNA:
* es un proceso semiconservativo. * es un proceso bidireccional. * es un proceso semidiscontínuo. * la enzima clave en la replicación del DNA es la DNA polimerasa.5´ 3´

Dependiente de molde Requiere un cebador 3´-OH libre

1-Replicación: es semiconservativa

Experimento de Meselson y Stahl (1958)

2-Generalmente Bidireccional:A partir de un Origen de Replicación dos Horquillas de Replicación

Unidireccional: Mitocondrias Otras Estrategias de Replicación, Virus (círculo Rodante)

3-Semidiscontinua
Fragmentos de Okazaki Una de las hebras escopiada de forma continua. Llamada hebra continua
La otra hebra es copiada de en forma de FRAGMENTOS de 1000-2000 bases, en Procariotas o 100-200 bases en Eucariotas. Llamada Hebra Discontinua o Hebra Retrasada o Retardada
Estos Fragmentos se conocen como Fragmentos de OKAZAKI

Enzimas Implicadas en la Replicación DNA Polimerasas
Características Generales

1-Sustratos DNA monocatenarioDesoxinucleotidos Trifosfatos (dNTP) Extremo 3’-OH libre 2-Reacción: Formación de un enlace Fosfodiester Cataliza el ataque nucleofílico de un extremo 3’-OH libre Sobre el fosfato alpha del dNTP Polimerización en sentido 5´---- 3´ 3-Procesativas o Progresivas (frente a dispersivas). Son capaces de catalizar multiples Ciclos. No abandonan el sustrato (DNA monocatenario) . Cataliza una serie de pasossucesivos de polimerización sin liberar el molde

4-Tienen Actividad Autocorrectora
La tasa de error determinada exclusivamente por el apareamiento entre bases es alta (1 error /1000 Nucleótidos.

La tasa de error de la DNA polimerasa de E. Coli es de 10-7 . Autocorrección Actividad Exonucleasa 3´-5´
Algunas DNA polimerasas también tienen actividad Exonucleasa 5´--3´.

Dominio de Klenow5-Necesitan un Cebador para polimerizar. No son capaces de iniciar la síntesis de DNA

Tipos de DNA polimerasas de E. coli Pol I Peso Molecular Número moléculas célula V max Nucleotidos/s 3’ exonucleasa 5’ exonucleasa Procesividad Función 103000 400 16-20 Si Si 3-200 Reparación DNA Procesamiento Cebadores Pol II 90000 100 2-5 Si No 10.000 ¿Reparación? ¿Respuesta SOS? Pol III 130000 10 250-1000Si No 500.000 Elongación en la replicación

Tema 12: Replicación y Reparación

DNA polimerasa III

* Holoenzima formada por 10 tipos de cadenas polipeptídicas diferentes.

* Es un dímero asimétrico.

* El complejo tiene una masa de aproximadamente 900 kd.

* Puede copiar más de 4.5 millones de nucleótidos (4.5 megabases) sin separarse del DNA (1 kilobase /segundo).

Tema 12:Replicación y Reparación

¿ Cómo se organiza este complejo ?
Core αεθ : actividad polimerasa. Complejo γ (γ, δ, δ´, ψ , χ) : responsable de la unión del complejo DNA polimerasa III al DNA. Cataliza (ATP) la unión de un dímero β (anillo) a la cadena de DNA.

Dímero τ : mantiene unido el complejo γ y el core.

Dímero β : acerca el core al DNA aumentando la procesividad de la polimerasa.

Tema...