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PRACTICA 4

Docente: Dr. José Luis Gómez-Olivares

DESCONGELACIÓN CELULAR Y CULTIVO EN MONOCAPA
INTRODUCCIÓN
Las células que crecen adheridas a un substrato, suelen multiplicarse hasta cubrirla
superficie del recipiente de cultivo, al hacerlo generan una capa de grosor de células.
Razón, por la que el sistema se denomina cultivo en monocapa. Conforme las células
proliferan el factorlimitante para continuar su propagación es el espacio disponible en
la caja de cultivo. Bajo esta situación, el cultivo llega a una etapa conocida como
confluencia, durante la cual las célulasdetienen temporalmente su proliferación, hasta
que se les subcultiva a menor densidad celular en un recipiente con medio fresco. Así,
podrán subcultivarse durante semanas o meses.
Cuando un cultivosecundario posee la capacidad de mantener su propagación y
características fenotípicas, puede llegar la decisión de almacenarse a bajas
temperaturas en presencia de suero y un crioprotector. El tiempoen que se mantengan
en congelación es variable, depende del nivel de utilización de las células. Para la
descongelación celular, existen factores importantes a tener en cuenta: temperatura,velocidad de descongelación y la eliminación del crioprotector.
Las células descongeladas deberán mostrar las distintas propiedades según su origen. Por
ejemplo, los fibroblastos (sintetizan abundantematriz extracelular), las células
derivadas de tejido muscular esquelético se fusionarán para generar fibras musculares
con capacidad contráctil espontánea, las células nerviosas extenderánprolongaciones
(axones) eléctricamente excitables que podrán conectarse (establecer sinapsis) con
otras células

nerviosas, las células epiteliales formarán largas capas con varias

propiedades de unepitelio intacto. Gracias a que estos fenómenos ocurren en cultivo, es
posible estudiarlos con diferentes metodologías, a veces no aplicables a tejidos intactos.

OBJETIVO GENERAL
Conocer el...