TP ELECTROFORESIS

Páginas: 8 (1781 palabras) Publicado: 12 de noviembre de 2015
La electroforesis es una técnica separativa que se basa en el fenómeno de migración diferencial que experimentan partículas cargadas eléctricamente al estar bajo la influencia de un campo eléctrico. La electroforesis puede utilizarse con fines analíticos o preparativos según cuál sea el objetivo perseguido: la identificación de sustancias o su separación cuando forma parte de una mezcla. 
Unacarga eléctrica inmersa en un campo eléctrico experimenta una
fuerza de atracción o repulsión , como describe la Ley de Coulomb:
Fe=k. q1.q2d2
La carga se desplazará en el medio hacia el polo que posee carga opuesta como consecuencia de la fuerza de atracción eléctrica: las moléculas cargadas positivamente se desplazarán hacia el cátodo (polo negativo) y las cargadas negativamente se desplazaránhacia el ánodo (polo positivo).Podemos comparar el movimiento de las partículas hacia cada uno de sus polos , con el movimiento de un objeto dentro de un liquido ( por ejemplo método de Stokes) , lo que causa que la partícula (en nuestro caso Aminoácidos) tengan una fuerza contraria a la dirección de movimiento, la fuerza de rozamiento, que es proporcional a la velocidad de la partícula.

Siendo k,el coeficiente de proporcionalidad o coeficiente de fricción, en el cual están incluidas variables como la viscosidad del medio, el tamaño y la forma de la partícula. La fuerza de rozamiento dependerá entonces de estas tres variables, además de la velocidad de la partícula.
Por lo dicho anteriormente, puede considerarse que durante todo el desplazamiento la sumatoria de fuerzas sobre la partículaes igual a cero, por lo tanto, está en equilibrio. Otras causas que intervienen en la velocidad con que la partícula se mueve son, la temperatura, la fuerza iónica y el pH del medio en el cual trabajamos.
La fuerza iónica es una medida de las cargas en una solución, estima la actividad de los electrolitos en solución según su carga y concentración. Una mayor fuerza iónica, da cuenta de una mayorconcentración de iones en la solución. Una partícula con carga cuando se halla en solución está rodeada por electrolitos de carga opuesta, como consecuencia de la acción de la fuerza de atracción electroestática. Es así que, una carga positiva en solución estará rodeada de cargas negativas y una negativa por carga positivas. Esta esfera de cargas en el entorno dependerá a su vez del número y tipo decargas disueltas en la solución (fuerza iónica). 
El pH influye sobre la carga que adquieren los grupos ácidos y básicos débiles presentes en las moléculas biológicas. Por lo tanto, se ionizan parcialmente en solución coexistiendo en equilibrio distintas especies y modificando su carga
La temperatura afecta la velocidad con la que se desplaza la partícula por incidir en tres instanciasespecíficas. En primer lugar, hay que considerar que la viscosidad del buffer es una constante física que depende de la temperatura, por ende el coeficiente de fricción variará según cuál sea el valor de la viscosidad del medio a la temperatura de trabajo. En segundo lugar, la energía cinética intrínseca de las moléculas, que determina el fenómeno de difusión, está en directa relación con la temperatura. Porúltimo, dadas ciertas condiciones de temperatura se ve afectada la evaporación del buffer lo cual altera su fuerza iónica.
Movilidad electroforética (μ) 
La movilidad electroforética de una molécula cargada que se mueve en un campo eléctrico, se define como el cociente entre la velocidad de la misma y el campo eléctrico aplicado. Es decir, es la velocidad que adquiere la partícula por unidad decampo eléctrico aplicado.
Podemos decir que la movilidad es una constante física para una sustancia si se mantienen constantes el medio (pH, fuerza iónica, viscosidad) y la temperatura. Por lo tanto está en íntima relación con las condiciones de trabajo seleccionadas. Es así que en condiciones dadas puede utilizarse como criterio de identificación.

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