Trabajo Laboratorio Numero 3







LABORATORIO N°3
DETERMINACION DE GLUCOSA POR METODOS CUANTITATIVOS Y CUALITATIVOS.INTRODUCCION

La glucosa es una fuente de energía en las células, los niveles normales en la sangre varían entre 70 -110 mg/dl. Para su regulación participan varias hormonas y órganos específicos. (1)
El riñón cumple la función reguladora, si la glucosa no es reabsorbida por el riñón, ésta aparece en la orina, en una condición conocida como glucosuria. Al pasar los170-180mg/100 ml de glicemia en la sangre, comienza a aparecer glucosa en la orina, siendo el máximo de reabsorción 350mg/min. Cuando se pasa este nivel, toda la glucosa sobrante se elimina mediante la orina. (2)
Para determinar las concentraciones de glucosa se utilizaran dos métodos:
Uno cualitativo (tiras colorimétricas) y otro método cuantitativo (0-toluidina) por medio de laexperimentación se podrá determinar cuáles son las ventajas y desventajas y también la diferencias que existen entre los dos métodos para la determinación de la concentración de glucosa.











1 Harvey Lodish. (2005). La vida comienza con las células. Biología celular y molecular, quinta edición, 16pp. . 
2 Pucv. (2015). determinación de glucosa por métodos cualitativos ycuantitativos. Laboratorios, 1, 19pp. .

Materiales


Espectrofotómetro /celdas.
Baño termostatizado.
Cronómetro.
8 tubos de ensayo.
1gradilla.
1pipeta graduada de 1 ml.
1 pipeta graduada de 5 ml.
1 pizeta.
Micropipeta de 20 ul, puntas.
Tira colorimétrica.Métodos

Método Cualitativo:
Tiras colorimétricas:
Es una prueba específica pero extremadamente simple. Las tiras reactivas están impregnadas de glucosa oxidasa, cuando son sumergidas en una solución de glucosa hay oxidación y se forma peróxido de hidrógeno, el cual oxida la orto-dianicidina, produciendo un cambiode color el cual indica la presencia de glucosa. (3)

Método Cuantitativo:
Método Químico o-toluidina:
El procedimiento de la o-toluidina es una reacción de color específica para hexosas (glucosa, manosa, galactosa).Dado que normalmente las aldohexosas que no sean glucosas se encuentran presentes en muy bajas concentraciones los resultados de este método se asemejan al verdaderovalor de la glucosa, el producto coloreado (mezcla de cromógenos verdes) tiene una absorbancia de 630 nm. (4)
La o-toluidina se condensa con la glucosa para dar un cromógeno verde a través de la formación de una mezcla en equilibrio de una glucosilamina y una base schiff.








3 Alfonso R. . (2003). análisis clínico. Remington Farmacia, 1, 673pp. . 
4 Alfonso R. . (2003). análisisclínico. Remington Farmacia, 1, 657 pp.
Resultados

Método de o-toluidina
Determinación de la concentración de glucosa en los tubos 1, 2, 3, 4,5 y 6
 La fórmula formal para calcular una dilución es C1*V1 = C2*V2, donde C1 y C2 representan las concentraciones de las soluciones iniciales y finales respectivamente y V1 yV2 representan sus volúmenes.
Tuvo 1:
 C1*V1 = C2*V2  
16 mg/dL * 0 ml = x * 3,5 ml x = 0 mg/dl

Tuvo 2:...