trabajos de investigacion

PRÁCTICA DE LABORATORIO: ESTUDIO DE PROTEÍNAS: REACCIÓN DE BIURET Y XANTOPROTEICA 1
ESTUDIO DE PROTEÍNAS
OBJETIVOS
 Conocer una técnica básica de análisis bioquímico para la identificación deproteínas.
 Experimentar la desnaturalización de proteínas.
MATERIAL
- Gradilla. - Rejilla de amianto. - Cuentagotas. - CuSO4 al 1%.
- Tubos de ensayo. - Mecheros o placas eléctricas. -Agua. - HNO3 al 20%.
- Pipetas. - Vasos de precipitados. - NaOH al 20%. - NH3 al 25%.
- Pipeteadores. - *Disolución de albúmina comercial al 2%. - Varilla de vidrio.
* En lugar de albúminacomercial puede utilizarse clara de huevo:
1º. Se bate suavemente la clara de un huevo durante 2 ó 3 minutos.
2º. Se le añade 5 veces su volumen de agua.
3º. Se filtra la mezcla y se recoge el líquidoresultante (disolución de albúmina).
1. REACCIÓN DE BIURET
FUNDAMENTO TEÓRICO
La reacción de biuret es un método colorimétrico (ensayo cualitativo) que permite detectar
la presencia de péptidosde más de dos aminoácidos y proteínas. Los dipéptidos y los
aminoácidos, a excepción de histidina, serina y treonina, no dan positiva esta reacción, porque
hace falta un mínimo de dos enlacespeptídicos para que ocurra. Se utiliza para determinar la
presencia de proteínas en líquidos biológicos como el suero sanguíneo y la sangre, aunque no en
la orina, porque la urea interfiere lareacción.
Esta prueba se basa en la reacción que se produce entre los nitrógenos de los grupos animo
que participan en los enlaces peptídicos y los iones cúprico (Cu2+) del CuSO4, lo que da lugar a
laformación de un compuesto, llamado biuret, cuyo color oscila entre azul, violeta y rosa,
dependiendo de la naturaleza de la proteína detectada.
PROCEDIMIENTO
1. Vierte 1,5 ml de disolución dealbúmina en un tubo de ensayo. Utiliza una pipeta graduada.
2. Añade al tubo de ensayo 0,5 ml de NaOH (crea un medio básico, para que pueda actuar el
Cu) y 4 ó 5 gotas de CuSO4.
 ACTIVIDADES...