“Transferencia De Material Genético I: Conjugación

FACULTAD DE QUIMICA



BIOQUÍMICA EXPERIMENTAL 0141



GRUPO 2



PRÁCTICA # 5:

“TRANSFERENCIA DE MATERIAL GENÉTICO I: CONJUGACIÓN”



FECHA DE ENTREGA: 14 DE ABRIL del 2009

OBJETIVOS

• Identificar al DNA como portador de la información genética.
• Conocer los mecanismos por los que una bacteria puede adquirir un plásmido.
• Reconocer a la conjugaciónbacteriana como un fenómeno de transferencia horizontal de material genético.
• Entender el mecanismo por el cual se realiza la conjugación bacteriana.

HIPÓTESIS

Si se utilizan dos cepas con diferente resistencia a antibióticos (donadora con resistencia a kanamicina y receptora con resistencia a estreptomicina) y estas son parte del proceso de conjugación in vitro, entonces al llevarse acabo este mismo la cepa trasconjugante adquirirá resistencia a la kanamicina y a estreptomicina y por lo tanto crecerá en medios con estos antibióticos.

RESULTADOS

-Controles:

Escherichia coli JM1452Str: cepa receptora
• Creció en medio con estreptomicina
• No creció en medio de kanamicina

Escherichia coli W3110/FKmTn3: cepa donadora
• Creció en medio con kanamicina• No creció en medio con estreptomicicna

-Resultados de parchado:

Cepa receptora parchada en medios de estreptomicina y kanamicina
• Se desarrollaron 50 colonias en Agar Luria-estreptomicina


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• No hubo desarrollo en Agar Luria-kanamicina


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Cepa transconjugante parchada en medios de estreptomicina y kanamicina

• Se desarrollaron 50 colonias enestreptomicina


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• 23 colonias crecieron en kanamicina

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Tabla 1. Número de colonias obtenidas en las cajas Petri de cada equipo.

|Equipo |RStr |Rkan |CStr |Ckan |
|1 |50 |P |50|50 |
|2 |50 |0 |50 |P |
|3 |50 |0 |50 |23 |
|4 |50 |0 |50|24 |
|5 |50 |0 |50 |13 |
|6 |50 |2 |49 |43 |
|7 |50 |0 |50|P |
|8 |50 |5 |50 |15 |

ANÁLISIS DE RESULTADOS

Para el desarrollo de esta práctica fue de suma importancia hacer una siembra de cada una de las cepas Escherichia coli W3110/FKmTn3 (cepa donadora) y Escherichia coli JM1452 Str (cepa receptora) paracomprobar la resistencia a los antibióticos y verificar que no estuviesen contaminadas, por ello realizamos los controles con estas cepas para demostrar que tenían las características deseadas. Los resultados obtenidos fueron los esperados, ya que la cepa donadora (Escherichia coli W3110/FKmTn3) presentó desarrollo en el medio Luria-agar-2% sulfato de kanamicina y no hubo desarrollo en el medioLuria-agar-2% sulfato de estreptomicina porque esta cepa es resistente a kanamicina, mientras que la cepa receptora (Escherichia coli JM1452 str) presentó desarrollo en el medio Luria-agar-2% sulfato de estreptomicina y no hubo desarrollo en el medio Luria-agar-2% sulfato de kanamicina porque esta cepa es resistente estreptomicina.

Posteriormente se mezclo la cepa donadora (en la cuál hay...