trigliceridos
Se producen reacciónes químicas basadas en la determinación química de glicerol a partir de triglicéridos.
A) La primera etapa consiste enque los triglicéridos son hidrolizados enzimáticamente por una lipoproteína lipasa específica, produciendo glicerol y ácidos grasos.
Lipoproteína lipasaTriglicéridos Glicerol + ácidos grasos
B) En una segunda etapa el derivado fosforilado se oxidamediante la glicerol fosfato oxidasa (GFO), con producción de agua oxigenada.
Glycerol kinasa
Glicerol-1-fosfato + ATPGlicerol-1-P + ADP
C) En una tercera etapa el derivado fosforilado se oxida mediante la glycerol fosfato oxidase ( GPO), con producción de agua oxigenadaGPO
Glicerol-1-fosfato + + Dihidroxiacetanafosfato
Finalmente el agua oxigenada así formada produce la uniónoxidativa del fenol y la 4-aminofenazona, en reacción catalizada por la peroxidasa (POD), con formación de una quinonoimina roja.
POD2 + 4-AF + Clorofenol 4-(p-benzoquinona monoimino)
Fenazona + 4 O
2. REACTIVOS PROVISTOSEstándar : Solución acuosa de glicerol equivalente a 200 mg % de triglicéridos
Buffer : Solución de buffer conteniendo clorofenol a pH 7,5
Enzimas : Viales conteniendo lipoproteína lipasa, glicerolkinasa ( GK ), glicerol fosfato oxidasa ( GPO), peroxidasa ( PDO ), adenosina trifosfato ( ATP ) y 4-aminofenazona(4-AF)
INSTRUCCIONES PARA SU USO:
1. Estándar:...
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