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FÓRMULA QUÍMICA DEL BIURET
REACCIÓN DEL BIURET (CARACTERIZACIÓN DE TRIPÉPTIDOS EN ADELANTE)
Fundamento:
Los péptidos y proteínas producen una reaccióncoloreada muy usada para la valoración de los mismos, llamada reacción del Biuret. Las proteínas por sus uniones peptídicas reaccionan con los iones cúpricos del reactivo en medio alcalino formando uncomplejo de color violeta. Se necesitan 2 ó más uniones peptídicas para que se forme el complejo coloreado.
El Reactivo de Biuret es aquel que detecta la presencia de proteínas, péptidos cortos yotros compuestos con dos o más enlaces peptídicos en sustancias de composición desconocida.
Está hecho de hidróxido potásico (KOH) y sulfato cúprico (CuSO4), junto con tartrato de sodio y potasio(KNaC4H4O6·4H2O). El reactivo, de color azul, cambia a violeta en presencia de proteínas, y vira a rosa cuando se combina con polipéptidos de cadena corta. El hidróxido de potasio no participa en lareacción, pero proporciona el medio alcalino necesario para que tenga lugar.
Se usa normalmente en el ensayo de Biuret, un método colorimétrico que permite determinar la concentración de proteínas de unamuestra mediante espectroscopia ultravioleta-visible a una longitud de onda de 560 nm (para detectar el ion Cu2+).
PROCEDIMIENTO
Se toma un tubo de ensayo y se colocan tres centímetros cúbicos dealbúmina de huevo, es decir la clara.
Se añaden 2 centímetros cúbicos de solución de hidróxido de sodio al 20%.
Más adelante se agregan 4 o 5 gotas de solución de sulfato cúprico diluida al 1%.
Elresultado es que la mezcla se torna de color violeta, indicando la presencia de proteínas.
REACTIVO DE DRAGENDORFF
DRAGENDORFF, REACCION DE: (Timol). Calentando un cristalito de timol enácido acético glacial y unas gotas de ácido sulfúrico. Se obtiene una coloración rosa viva. Sensibilidad1ppm.
DRAGENDORFF, REACTIVO DE: (Alcaloides y albuminoides). Se calienta a ebullición la...
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