Técnicas Histológicas

El límite de resolución del M.O. (0.2m) está limitado por la
longitud de onda de la luz visible
• El M.E. permite una mayor resolución dado que utiliza un haz
de electrones acelerados a granvelocidad que tienen una
longitud de onda mucho menor que la de la luz
• En el M.E.T. los electrones acelerados atraviesan una sección
ultrafina (60-80 nm), produciéndose una dispersión de loselectrones en diferentes trayectorias características de la
ultraestructura del material observado.
• M.E.B. los electrones no atraviesan la muestra sino que explora
(barre) su superficieformando una imagen tridimensional Microscopio Electrónico de Transmisión (MET)
• El Filamento de tungsteno es la fuente
de electrones
• Las Lentes electromagnéticas
(electroimanes) dirigeny enfocan el
haz de electrones hacia la sección
ultrafina de tejido
• El Sistema de vacío evita que los
electrones sean desviados por las
moléculas del aire
• Pantalla fluorescentepermite ver la
imagen aumentada y proyectada a
tiempo real
• Sistema de registro (placa fotográfica
o registro digital) para su estudio
posterior
• Las muestras para MET precisan de unprocedimiento técnico específicoMoldes
La resina polimeriza a 60º
SECCIONES SEMIFINAS (1m)Tinción de secciones semifinas (0.5-1m)
• Permite orientarnos en la
muestra y seleccionar la zonaa partir de la cual haremos las
secciones ultrafinas
• El azul de toluidina se infiltra
en la resina calentada en una
plancha y llega al tejido
Proceso de tinción de una sección semifina.La porosidad de la resina, el calor
y las propiedades del colorante (azul de tolouidina) hacen que se pueda teñir el
tejido sin necesidad de eliminar previamente la resina . Contraste desecciones ultrafinas (80nm)
• El OsO4 se une a lípidos
• El acetato de uranilo se une a los
Ac nucleicos
• El citrato de plomo se une
inespecificamente a distintas
biomoléculas
•...