Uso Del Cromatografo

UNIDAD: CROMATOGRAFÍA DE LÍQUIDOS

USO DEL CROMATÓGRAFO HPLC

Objetivo: Instruir al estudiante en el uso del cromatógrafo HPLC

Material:
Jeringa para inyección de la muestra

Reactivos:Solventes desgasificados
Muestra patrón

PROCEDIMIENTO:
I). Encendido del equipo. El equipo consta habitualmente de tres unidades: el cromatógrafo, el integrador y la PC con el software PeakSimple 3D.
a) En la parte trasera del cromatógrafo y el integrador se encuentran los interruptores para encender ambas unidades.
b) Encender la PC y abrir el programa PeakSimple3D.II) `Purga del inyector. Antes de realizar este procedimiento, es necesario tener lista la alimentación de la fase móvil, considerando mantener arriba el nivel del depósito con respecto alcromatógrafo. El procedimiento de purga del inyector elimina las burbujas de aire y previene la entrada de éste a la columna y por ende optimiza el desarrollo del método.
a) Colocar firmemente la jeringa deplástico en la entrada de la válvula PRIME/PURGE VALVE.
b) Abrir la válvula en sentido contrario a las manecillas del reloj.
c) Aspirar volumen a modo de extraer el aire presente en lalínea.
d) Al mismo tiempo oprimir la tecla PRIME. Detenerla
e) Cerrar la válvula y desechar el contenido de la jeringa.
f) Repetir los pasos a-d hasta completar la eliminación deaire.

III) Purga del sitio de enjuague del pistón. La purga elimina el aire cuando se conecta de forma inicial la tubería que permite la recirculación del líquido que enjuaga el pistón.Este procedimiento es útil en los casos en los que la fase móvil se encuentra constituida por solutos que tiendan a cristalizar en el pistón (e.g. buffers).
a) Colocar la tubería respectiva.b) Aspirar el líquido de enjuague desde el extremo de la manguera superior con ayuda de la jeringa de plástico.
c) Observar cómo el líquido se mueve contra la gravedad desde el depósito y a...