`Practicas microbiologia

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13/10/03
PRACTICA 17: SIEMBRA NASAL.

▪ FUNDAMENTO:
El objetivo de esta práctica es aislar e identificar colonias de las fosas nasales en medio sólido. Aislamos mediante una técnica de aislamiento en agar sangre e identificamos el tipo de microorganismos mediante una tinción de GRAM.

▪ MATERIAL:
-Escobillón.
-Medio de cultivo (agar sangre).-Mechero.
-Portaobjetos.
-Asa de platino.
-Cristalizador.
-Varillas.
-Pinzas de madera.
-Vaso de precipitados.
-Solución salina.
-Agua corriente.
-Cristal violeta.
-Lugol (solución mordiente).
-Alcohol-acetona.
-Safranina o fucsina diluida.

▪ TÉCNICA:

1. Tomamos la muestra con un escobillónestéril con cuidado para no contaminarlo.
2. Sembramos usando cualquier técnica aislamiento de las vistas en prácticas anteriores. En este caso utilizamos la técnica de zig-zag.
3. Dejamos incubar 24 horas a 37º C.
4. Realizamos la tinción de GRAM.

▪ RESULTADOS:
Las colonias están aisladas al final de la siembra.
Se observan diplococos, sarlinas y tétradas GRAM+.
[pic]
15/10/03
PRACTICA 18: EXÁMEN EN FRESCO. PREPARACIONES HÚMEDAS (entre porta y cubre).

▪ FUNDAMENTO:
La observación de gérmenes vivos se utiliza para la observación de la movilidad, para la morfología, las agrupaciones de los gérmenes y para la observación de quistes, huevos de parásitos, etc.
Consiste en colocar mediante un asa desiembra o una pipeta, una gota de la suspensión microbiológica a examinar sobre un porta, sobre el que se coloca un cubre.

▪ MATERIAL:

-Muestra nasal (Chapman).
-Mechero.
-Portaobjetos.
-Cubreobjetos.
-Asa de platino.
-Solución salina fisiológica.

▪ TÉCNICA:

1. Lavamos el portaobjetos para eliminar la suciedad y la grasa.2. Ponemos una gota de suspensión salina.
3. Flameamos el asa y cogemos una colonia de la placa que tenemos preparada.
4. Colocamos una colonia en el porta, contactando con la gota de solución salina.
5. Ponemos el cubre encina de la gota.
6. Observamos al microscopio con el objetivo de 40x.

▪ RESULTADOS:

Se observan cocosmóviles.

15/10/03
PRACTICA 19: EXAMEN EN FRESCO. MÉTODO DE LA GOTA PENDIENTE.

▪ FUNDAMENTO:
La observación de gérmenes vivos se utiliza para la observación de la movilidad, para la morfología, las agrupaciones de los gérmenes y para la observación de quistes, huevos de parásitos, etc.
Se observan mejor la movilidad de los microorganismos. Para la técnica seutilizan portas excavados.

▪ MATERIAL:

-Muestra nasal (Chapman).
-Mechero.
-Portaobjetos excavado.
-Cubreobjetos.
-Asa de platino.
-Solución salina fisiológica.
-Vaselina.

▪ TÉCNICA:

1. Limpiar el porta.
2. Poner en el porta una gota de solución salina fisiológica (no demasiado grande pero tampoco demasiadopequeña para evitar la desecación.
3. Coger con el asa una colonia y contactar con la gota (sin estenderla).
4. Poner vaselina alrededor del cubre para pegarlo al porta.
5. Se coloca el porta sobre el cubre. Intentar que quede la gota en el centro, presionamos e invertimos.
6. Observar al microscopio con el objetivo de 40x.[pic]

▪ RESULTADOS:
Se observan cocos móviles.

▪ OBSERVACIONES:
Es una técnica muy lenta y en ocasiones se producen distorsiones de imagen. Debemos echar poca vaselina en el borde para que no se mezcle con la gota.

▪ RESIEMBRAS:

En M-H sembramos de Chapman la muestra nasal.
En CLED sembramos de TSA la muestra nasal....
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