S. aureus

DIAGRAMA DE BLOQUES PARA STAPHYLOCOCCUS AUREUS

Incubación de las placas
37 °C ± 2°C por 24 h.
Incubación del caldo cerebro corazón
Seleccionar de 3 a 5 colonias y cultivar en caldo cerebro corazón
Marcar las colonias características (de 1 a 1.5 mm de diámetro, negras o grises, brillantes y convexas, rodeadas de una zona clara)
Confirmación gram
Gram (-)

Gram (+)

Fin de laprueba
37 °C ± 2°C de 18 a 24 h.
Extensión de muestra en placa
Plaqueo sobre superficie de agar Baird Parker 0.1 ml de cada dilución (sembrar por triplicado)
Preparación del homogeneizado de la muestra
Preparación de diluciones
Incubación de las placas
37 °C ± 2°C por 24 h.
Incubación del caldo cerebro corazón
Seleccionar de 3 a 5 colonias y cultivar en caldo cerebro corazón
Marcarlas colonias características (de 1 a 1.5 mm de diámetro, negras o grises, brillantes y convexas, rodeadas de una zona clara)
Confirmación gram
Gram (-)

Gram (+)

Fin de la prueba
37 °C ± 2°C de 18 a 24 h.
Extensión de muestra en placa
Plaqueo sobre superficie de agar Baird Parker 0.1 ml de cada dilución (sembrar por triplicado)
Preparación del homogeneizado de la muestraPreparación de diluciones
























DIAGRAMA DE BLOQUES PARA EL TEST DE LA COAGLASA
Caldo cerebro corazón
Caldo cerebro corazón

Tomar 0.3 ml del caldo y añadir 0.5 de plasma de conejo oxalatado
Tomar 0.3 ml del caldo y añadir 0.5 de plasma de conejo oxalatado

Incubación de los tubos
Incubación de los tubos

Observación paradetección de coagulación
Observación para detección de coagulación

35 °C de 2 a 24 h.
35 °C de 2 a 24 h.

RESULTADOS DEL LABORATORIO PARA PRUEBAS DE S. AUREUS
En el cuadro se presentan los resultados para las UFC en agrar Baird Parcker enriquecido con yema de huevo para la identificación de S. aureus.
En todas las cajas de las tres diluciones que a su vez fueron sembradas entriplicado hubo un crecimiento muy elevado de colonias presuntivas de Staphylococcus aureus, pero se tomo para contar las cajas de la dilución 10-3 ya que las otras dos diluciones eran incontables.
Posteriormente algunas colonias presuntivas de esta dilución fueron resembradas en tubos con caldo de cultivo nutritivo y posteriormente resembradas en agar nutritivo por medio de estría cruzada para tenerel cultivo 100% puro ya que en las tinciones de gram se pudo observar que estaban contaminadas con bacilos.
Después de incubar por 24 h en agar nutritivo Se tomaron las colonias que posiblemente pertenecían a Staphylococcus aureus y realizo una tinción de gram para poder observarlas al microscopio y así con sus características típicas estar seguros de que se trataba de Staphylococcus aureus ypara ello se tomaron en cuenta algunas de las siguientes características: son gram positivos es decir que se tiñen de color azul, crecen aislados, en masas irregulares agrupadas como racimos de uvas , posterior a esto se sembró en caldo cerebro corazón y se incubo por otras 24 h, luego se realizo nuevamente una tinción de gram para estar 100% seguros de que se trataba de Staphylococcus aureus y asífue ya que todas las pruebas señalaban su presencia por que cumplía con todas las características especificadas, posterior a esto se guardo en refrigeración ya que no se contaba con plasma de conejo para realizar el test de la coagulasa.
Dicho conteo se realizo en la dilución 10-3 obteniendo los siguientes resultados
Dilución 10-3 | Numero de colonias presentes en la placa |
Placa 1 |556 |
Placa 2 | 772 |
Placa 3 | 724 |
Promedio | 684 |

Dilución 10-3
Dilución 10-3

Las UFC se obtendrán con la formula siguiente
UFC / g = N / vol x dil
Donde:
UFC: unidades formadoras de colonias
N: número promedio de colonias obtenidas para la dilución 10-3 = 684
Vol: volumen del inóculo= 0.1 ml
Dil: dilución= 10-3
Sustituyendo en formula tenemos:
UFCg=684(0.1...