bioquimica

Páginas: 15 (3592 palabras) Publicado: 17 de mayo de 2013
UÑIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA FACULTAD DE MEDICINA HUMANA

PRACTICA 1

"SOLUCIONES BUFFER"

El objetivo de esta práctica es señalar al estudiante una de las técnicas elementales utilizadas en el laboratorio bioquímico y clínico, para determinación del metabolismo hídrico y minerales.


PARTE I

a) Soluciones tampón o buffer:

El buen funcionamiento de los sistemas biológicosrequiere de un control estricto del pH que rodea a estos sistemas ya que los procesos metabólicos son inactivos fuera de ciertos límites de acidez o alcalinidad.

El saber preparar un buffer es importante debido a que su propiedad de mantener casi invariable el pH de una solución los hace imprescindibles en el estudio de reacciones enzimáticas in vitro".

Se presume que la teoría es conocida por elestudiante habiendo sido revisada en el curso de física o química. En general hasta la ecuación de Henderson Hasselbach.

pH = pKa + log sal
ácido


Esta ecuación permite calcular la relación molar entre la sal (aceptor de protones) y el ácido (donador de protones) para un pH y pK determinados.












ESTRUCTURA Y FUNCIÓN CELULAR TISULAR II LABORATORIOS 1
UNIVERSIDADNACIONAL DE PIURA FACULTAD DE MEDICINA HUMANA



I. EJERCICIOS DE PRÁCTICA

1.-

A) Preparar 50 ml. De una solución 0.02 m de buffer fosfato pH 7.5 a partir de:

Una solución 0.1M de Na2HP04 (fosfato disódico)
Una solución de 0.05M de NaH2HP04 (fosfato monosódico)

a) Medir el pH
b) Añadir 1 ml HCI (0.05N), medir el pH nuevamente.
c) Medir el pH de 50 ml de H2Odestilada.
d)Añadir l ml HCI (0.05N).
e) Medir el pH nuevamente.

a) Las relaciones involucradas en cada experimento

solución 0. 1 M. de Na2PO4 (fosfato de sodio)
solución de 0.05M. de NaH2HP04 (fosfato monosódico)

b) Los cálculos efectuados para la determinación de las cantidades de las diferentes soluciones a emplearse en cada caso.

A continuación hallaremos la cantidad de volumen que se necesitanpara preparar el Buffer fosfato 0,02M a pH 7,5. Para esto utilizaremos algunos cálculos matemáticos y químicos






ESTRUCTURA Y FUNCIÓN CELULAR TISULAR II LABORATORIOS 2


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H 2P + OH HP + H3O+


pH = PKa + Pb [sal]
[ácido]


7,5 = 6,8 + log ; si sal =a


0,7=log a
0,02-a5,0119 = a
0,02a

a = 0,0167molNa2PO4

Luego calculamos el volumen que necesitamos de Na2PO4

0,1 mol deNa2PO4 1000 mI

8,35 x 104 mol de Na2PO4X

x = 8,35 mi de Na2PO4


Calculamos la cantidad de volumen de NaH2PO4 que necesitamos


0,02  0,0167 = 0,0033 moles de NaH2PO4

0,033 moles de NaH2PO4 1 00OmI
x 50 ml

x = 1,65 x 104moles deNaH2PO4





ESTRUCTURA Y FUNCIÓN CELULAR TISULAR II LABORATORIOS 3

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0,05 moles de NaH2PO4 1000 ml

1,65 x 104deNaH2PO4yml

y = 3,3 mi de NaH2PO4

c) Las lecturas obtenidas en el potenciómetro.

Debido a que no contamos con el potenciómetro, para medir el pH utilizaremos un indicador universal, quenos va a permitir calcular un pH aproximado pero no exacto, de acuerdo a la coloración que toma la muestra. Para esto debemos tener en cuenta la siguiente tabla:

Color
pH

Rojo
4

Anaranjado
5

Amarillo
6

Verde
7

Azul
8

índigo
9

Violeta
10

















En un vaso de precipitados tendremos el Buffer fosfato 0,02M a pH 7,5 que está formado por 8,35mi de Na2PO4y 3,3 mi de NaH2PO4 a lo cual le añadiremos agua destilada hasta completar los 50 mi

En otro vaso de precipitados solo tendremos 50 mi de agua destilada

Luego utilizamos el indicador universal para calcular el pH de cada uno de las soluciones que se encuentran en los vasos, observaremos que el vaso que está con agua destilada tiene un color verde, y podemos deducir que se...
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