bioquimica

Instituto Tecnológico de Tijuana
Ingeniería Bioquímica
Integrantes
Parada Carlos Miriam 12211006
Madriz Borboa Aldo 12210991
Limón Reyes Amanda Pamela 12210989
Hernández Hernández Herminio Alberto 12210969
Bioquímica I.Practica 2: Calibración del espectrofotómetro.
Dra. Socorro Heredia
Tijuana B.C 05 de Septiembre de 2014.
Índice
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Objetivo…………………………………………………………….. 3
Introducción…………………………………………….…………. 4
Antecedentes............................................................................. 5
Marco Teórico…………………………………………………….. 6Materiales y reactivos…………………………………...………. 7
Procedimiento y resultado……………………………………… 8
Conclusiónes……………………………………………………... 12
Objetivo
Comprobar los fundamentos teóricos de la ley de Lambert y Beer.
Uso correcto del espectrofotómetro.
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Introducción
En óptica, la ley de Beer-Lambert, también conocida como ley de Beer o ley de Beer-Lambert-Bouguer es una relaciónempírica que relaciona la absorción de luz con las propiedades del material atravesado.
La ley de Beer-Lambert relaciona la intensidad de luz entrante en un medio con la intensidad saliente después de que en dicho medio se produzca absorción. La relación entre ambas intensidades puede expresarse a través de las siguientes relaciones:
Para líquidos:
Para gases:

Donde:
, sonlas intensidades saliente y entrante respectivamente.
, es la absorbancia, que puede calcularse también como: 
 Es la longitud atravesada por la luz en el medio,
 Es la concentración del absorbente en el medio.
 Es el coeficiente de absorción,
 Es el coeficiente de absorción:
 Es la longitud de onda de la luz absorbida.
Es el coeficiente de extinción
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Antecedentes
Ley de Beer
De acuerdo conla ley de Beer, la absorbancia está relacionada linealmente con la concentración de la especie absorbente, c, y con la longitud de la trayectoria de la radiación en el medio absorbente o camino óptico, b. Esto es:
A=logP0P=abcDonde a es una constante de proporcionalidad llamada absortividad. Cuando la concentración c se expresa en moles por litro, y b en centímetros, la constante deproporcionalidad se denomina absortividad molar, y se designa por el símbolo e, y, puesto que la absorbancia es una magnitud adimensional, tendrá unidades de L cm-1 mol-1. En este caso, la ley de Beer adquiere la forma:
A= εbc5 | Página
Marco Teórico
Espectros de absorción
Un espectro de absorción es una representación gráfica de la absorbancia de un analito (o de otra magnitud equivalente) en función dela longitud de onda de la radiación, l, (o de otro parámetro relacionado con la energía de la radiación utilizada). El máximo de absorbancia obtenido en el espectro de absorción de un analito, nos dará la longitud de onda que proporciona la mayor sensibilidad posible, y por tanto será la que se utilizará en el análisis espectrofotométrico de dicho analito.
Todas las disoluciones que presentancolor, absorben radiación electromagnética perteneciente al espectro visible, el cual puede dividirse en varias zonas.
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Materiales y reactivos
Disolución KOH 0.05 N.
K2Cr2O7 50 mg/ml.
Muestra problema.
4 matraces aforados de 50 mL.
1 matraz aforado de 1 L.
4 cubetas para espectrofotómetro.
1 frasco de agua destilada.
1 pipeta.
1 Espectrofotómetro.
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Procedimiento yresultado
Obtención del espectro de absorbancia
Preparar las siguientes soluciones:
KOH 0.05 N (2.8 g de KOH en 1 L de agua destilada).
K2Cr2O7 de concentración de 50 mg/ml (20 mg de dicromato de potasio, 500 ml de KOH 0.05 N).
En 4 matraces volumétricos de 50 ml pipetee por separado lo siguiente:
3 ml de K2Cr2O7
7 ml de K2Cr2O7
10 ml de K2Cr2O7
13 ml de K2Cr2O7
Diluya cada una a 50 ml...