catalasa sanguinea



Universidad Católica del Norte
Sede Coquimbo
Facultad de Medicina




Informe Laboratorio Prácticos N° 6 y 7
“Actividad Enzimática: Catalasa Sanguínea”
ABP-1 “La Célula” Módulo IIIntegrantes:
Carla Gatica HernándezJuan Francisco Bórquez
Ignacio Gutiérrez Quiroz
Grupo de Laboratorio: 3Fecha de entrega: 24/05/2011
Introducción
Las enzimas son consideradas como las estructuras proteicas más fundamentales para la regulación de las reacciones químicas en los sistemas biológicos debido a su alto grado de especificidad respecto a su sustrato y a su gran poder catalítico en las distintas reacciones sin alterar el equilibrio de las mismas. La catálisis enzimática de lasreacciones es esencial para los sistemas vivos, ya que, al no estar catalizadas tienden a ser muy lentas (Nelson & Cox, 2006).
Para que las reacciones químicas del organismo ocurran en el momento y a la velocidad requerida para un funcionamiento favorable, las enzimas cumplen su función de catalizar estas reacciones químicas. Esto se logra disminuyendo la energía de activación necesaria para unareacción uniendo los sustratos específicos a su sitio activo correspondiente. Esto implica que la reacción ocurra a una mayor velocidad. El catalizador mismo no sufre ninguna alteración permanente en el proceso y se puede volver a utilizar, incluso repetidamente (Curtis & Barnes, 2000).
La actividad de toda enzima puede verse alterada por distintos factores que interfieren con su ambiente óptimo deacción,
En este informe, se presentarán las temáticas experimentadas y estudiadas de los prácticos 6 y 7 de laboratorio, con el objetivo de observar, registrar y graficar las distintas alteraciones de la actividad enzimática de la catalasa mediante factores de pH y temperatura del medio, concentraciones de enzima y/o sustrato y presencia de un inhibidor que por lo general modifica de manera negativala acción natural de una enzima.
La catalasa es una hemoproteína presente en los eritrocitos de la sangre, que posee actividad óxido reductasa donde emplea una molécula de H2O2 como sustrato donador de electrones y otra de la misma como aceptor de electrones. Una manera de determinar su actividad enzimática consiste en medir el peróxido remanente de un medio de reacción mediante la titulacióncon KMnO4 después de incubar la enzima en presencia de un exceso de H2O2 (sustrato). Se usa ácido sulfúrico para detener la reacción.

Resultados
Se realizó un prolijo seguimiento de los cambios en la actividad enzimática de la catalasa sanguínea con respecto a la concentración, temperatura, pH e inhibidor, que en esta oportunidad se ocupó KCN. Los resultados obtenidos fueron registradossegún el factor correspondiente en las siguientes tablas y representados en los gráficos respectivos.
Tabla 1. Efecto de la concentración de la catalasa sanguínea sobre su actividad.
N°
mL de H2O2 pH 7 0,24 %
µmoles de H2O2
mL de enzima
mL de H2O2 2N
mL de KMnO4 gastados
µmoles de H2O2 remanentes
Velocidad (µmoles de H2O2/min)
1
5
350
0,0
5
2,2
350
0
2
5
350
0,1
5
2
318
32...