Complemento

Pruebas diagnósticas basadas en la respuesta inmunitaria

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¿Por qué utilizamos el diagnóstico inmunológico?

• El diagnóstico clínico no suele ser definitivo. • Las lesiones histológicas pueden ser indicativas pero pocas veces son patognomónicas • A veces, el diagnóstico microbiológico es lento, complicado o imposible

Principales motivos de utilización del diagnóstico inmunológico2

Respuesta secundaria

Intensidad de la respuesta

Respuesta primaria

IgG>>IgM

IgM>> IgG
Tiempo

Periodo de inducción (0-14 días)

Esquema de la respuesta inmune primaria y secundaria

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Título: Máxima dilución a la cual un suero continúa siendo positivo en una prueba serológica determinada Seroconversión: Aumento del título de anticuerpos x4 o paso de negativo a positivoIntensidad de la respuesta

Seroconversión

Tiempo

Conceptos de título de anticuerpos y seroconversión

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Conceptos básicos
• Las IgM normalmente reflejan una infección reciente • El aumento del título de anticuerpos indica una infección reciente • A veces, simplemente con determinar un título elevado podemos suponer que se ha producido una infección reciente • Los títulos de IgGpor sí solos suelen indicar uan infección pasada

Conceptos básicos de interpretación de resultados

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1. Pruebas basadas en la detección de anticuerpos

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Pruebas de aglutinación
Se utilizan con antígenos particulados tales como una suspensión bacteriana. Detectan preferentemente IgM

+

Rosa de Bengala (brucelosis)

Este tipo de pruebas suele ser extremadamente sensiblepero, al mismo tiempo suele padecer de falta de especificidad por el hecho de ser mayoritariamente IgMs lo que se detecta

Pruebas de aglutinación: Se basan en la unión de antígenos particulados a los anticuerpos, preferentemente de clase IgM. Suele tratarse de pruebas muy sensibles pero con poca especificidad. Ejemplos de este tipo de pruebas es la aglutinación con rosa de Bengala empleada en eldiagnóstico de la brucelosis.

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Pruebas de precipitación
Se utilizan con antígenos solubles a los que se permite difundir en una matriz semisólida

Línea de precipitación

Inmunodifusión en gel de agar

Se trata de pruebas relativamente sensibles y específicas pero con un elevado componente subjetivo y muy engorrosas

Pruebas de precipitación: En este caso se utilización antígenossolubles que se difunden frente a los anticuerpos. La unión antígeno-anticuerpo precipita de forma visible y permite establecer la presencia de anticuerpos específicos. Un ejemplo clásico de este tipo de pruebas es la inmunodifusión en gel de agar utilizada históricamente en el diagnóstico de la leucosis bovina.

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Fijación del complemento
La fijación del complemento se basa en la capacidaddel complemento para unirse a los complejos antígeno-anticuerpo. La prueba incluye la adición de eritrocitos sensibilizados con una hemolisina. Si el suero posee anticuerpos específicos, se fija el complemento y no puede unirse a la hemolisina para lisar los eritrocitos. Se trata de una prueba muy específica. C +
Suero Antígeno

positivo
ne g

C C

C positivo

C C

C

ati v

o

CC C
ne g

ati v

o

C C

C C

positivo

negativo

Fijación del complemento: Como hemos visto en capítulos anteriores, el complemento posee la capacidad de unirse a los complejos antígeno anticuerpo (fijación). Esta capacidad es aprovechada en la prueba de fijación del complemento. Metodológicamente, la prueba se desarrolla en dos fases, una primera que es una reacción antígenoanticuerpo en un medio líquido y una segunda consistente en la adición de complemento, una hemolisina dependiente de complemento y eritrocitos. Si se ha producido reacción antígeno-anticuerpo, es decir, si el suero analizado contenía anticuerpos frente al antígeno, el complemento queda fijado y no puede activar la hemólisis de los glóbulos rojos. Un ejemplo clásico de utilización de esta prueba es...