Ensayos Enzimaticos

Contenido
1. PROYECTO DE INVESTIGACIÓN 3
1.1 Introducción 3
1.2 Hipótesis 4
1.3 Objetivos 4
1.3.1 Objetivo general 4
1.3.2 Objetivos específicos 4
1.4 Alcances y logros 5
1.5 Limitaciones 5
2. REVISIÓN DE LITERATURA 5
2.1 Aminoácidos 5
2.1.1 Generalidades 5
2.1.2 Importancia 6
2.2 Aminoácido L-aspártico. 7
2.2.3 Producción 7
2.2.4 Importancia y usos 7
2.3.1Métodos de inmovilización de enzima y/o célula 9
2.3.2 Selección del soporte 11
2.4 Usos de células y enzimas inmovilizadas 13
2.4.1 Producción de antibióticos. 13
2.4.2 Producción de ácidos orgánicos 14
2.4.3 Producción de alcoholes. 14
2.4.4 Obtención de otros compuestos orgánicos 14
2.4.5 Tratamiento de aguas residuales 14
2.4.6 Usos médicos 15
3. MATERIALES Y MÉTODOS 16
3.1 Lugar,área de trabajo y período de estudio 16
3.2 Determinación de población y muestras 16
3.3 Descripción del proceso 16
3.3.1 Preparación del biocatalizador para inmovilización 16
3.3.2 Ensayos sobre la actividad enzimática de las células libres de la cepa productora del aminoácido L- aspártico. 17
3.3.4 Determinación de proteína 17
3.3.5 Inmovilización de las células microbianas en unsistema PVA-Ácido Bórico-Fosfato de Sodio. 17
3.3.6 Inmovilización de células microbianas en alcohol polivinílico con Alginato de sodio entrecruzado con ácido bórico. 18
3.3.7 Determinacion de los parametros cineticos de reaccion de bioconversion de fumarato de amonio en el aminoacido L-aspartico para las celulas y enzimas inmovilizadas. 18
3.3.8 Extracción y purificación de la enzimaaspartasa 19
3.3.9 Estudio Comparativo 19
3.4 Diseño experimental 19
3.5 Cronograma de Actividades 20
4. LITERATURA CITADA 22

1. PROYECTO DE INVESTIGACIÓN
1.1 Introducción
Desde los años de 1960 el desarrollo en la ingeniería enzimática ha tomado un gran auge, y en países como Japón se han logrado grandes avances en la aplicación de la biotecnología para la producción de aminoácidos y otroscompuestos orgánicos. Por lo que en los últimos 30 años la producción mundial de aminoácidos ha incrementado intensamente. El uso de enzimas como biocatalizadores presenta severas ventajas en comparación con los catalizadores químicos, por ejemplo, son específicos en acción, y por lo tanto minimizan la aparición de reacciones secundarias indeseables; son relativamente baratos cuando se utiliza deforma cruda, dependiendo de la enzima son eficaces para las conversiones químicas bajo una amplia gama de condiciones, pueden ser modificados y mejorados a través de métodos genéticos, son relativamente no tóxicos y, por tanto son aceptables para aplicaciones en procesos de alimentos y tratamientos medicinales; y sin mencionar las ventajas ambientales que presentan frente a otros métodos deproducción. Con el creciente mercado de aminoácidos y aunado a lo anterior, muchas empresas y asociaciones académicas han comenzado la investigación y desarrollo para producir aminoácidos de manera más eficiente. Una de las maneras para lograr una producción más eficiente en la biocatalisis, es a través de la inmovilización de células o enzimas, ya que de esta manera se otorga una mayor estabilidad ala célula o enzima, permite su reutilización; lo que aminora el costo y permite el desarrollo de procesos para la producción industrial del aminoácido.
En la selección de un método eficaz de inmovilización, debemos considerar la naturaleza de la enzima o célula a inmovilizar, de tal manera que el proceso de inmovilización no altere la actividad enzimática, desnaturalice la enzima o destruya lacélula. Para elegir un soporte de inmovilización debemos considerar, su capacidad para retener la célula o enzima, la capacidad de difusión del substrato y producto a través de el soporte, resistencia, estabilidad y precio.
Para la inmovilización de células yo enzimas, se han utilizado una gran diversidad de soportes, tanto de naturaleza orgánica como inorgánica, así como también, geles...