Enzimologia

ENZIMOLOGIA e BIOQUÍMICA CLÍNICA
PUCPR 2009 Profa. Mauren Isfer
Proteínas catalisadoras que aumentam a velocidade das reações sem serem, elas próprias, alteradas nesse processo
[S] + [E]
[ES]
[P]
1. Não geram sub-produtos indesejáveis; 2. Atuam em condições brandas de pH, temperatura e pressão; 3. Especificidade pelo substrato; 4. Controle das vias metabólicas.
ENZIMAS
ESTRUTURA dasENZIMAS Todas possuem estrutura 1ª, 2ª, 3ª A maioria possui estrutura 4ª (associação de subunidades ou protómeros) A alteração da estrutura acompanha-se de perda de atividade irreversível)
ENZIMAS
ISOENZIMAS
Enzimas com estrutura primária (seqüência de AA) diferente, catalisando a mesma reação (mesma função), codificadas por genes estruturais diferentes. Formas moleculares múltiplas de uma enzima.Isoenzimas diferentes podem originar-se de tecidos diferentes, e sua determinação específica pode fornecer pistas em relação ao sítio da patologia. Isoenzimas genéticas e não genéticas (isoformas modificação pós-transdução)
desnaturação (reversível ou
ENZIMAS
ESPECIFICIDADE
ENZIMAS
CLASSIFICAÇÃO em RELAÇÃO às REAÇÕES QUÍMICAS CATALISADAS
A zona sombreada são os aminoácidos desta enzima(proteína) que configuram, neste caso, o centro ativo da enzima
1
ENZIMAS
CLASSIFICAÇÃO em RELAÇÃO AO SEU LOCAL
ENZIMAS PLASMÁTICAS
Fatores que afetam os níveis enzimáticos no plasma ou no soro
1) Enzimas específicas do plasma
Trombina, plasmina, lipoproteína lipase.
Presente em concentração mais elevada, é específica do plasma e tem papel funcional no plasma.
2) Enzimas secretadas* 3) Enzimascelulares*
LDH, FAL, AST, ALT.
Lipase, amilase, colinesterase.
* Normalmente estão em concentração muito baixa e não tem papel funcional no plasma. Aparecem no sangue incidentalmente e tem valor diagnóstico.
A lesão dos tecidos de origem ou a proliferação aumentada das células de onde surgem estas enzimas levarão a um aumento da atividade dessas enzimas no plasma.
ENZIMAS de DIAGNÓSTICOPara que o diagnóstico do envolvimento de um órgão seja feito através de enzimas, deve-se: Conhecer a proporção entre as enzimas, que difere de tecido para tecido; Conhecer a cinética do aparecimento e desaparecimento da enzima no plasma. Enzimas que não são específicas do plasma são depuradas do plasma em velocidades variáveis (estabilidade da enzima e captação pelo sistema retículo-endotelial).ENZIMAS de DIAGNÓSTICO
Principais enzimas utilizadas no diagnóstico de doenças são:
Fosfatase Ácida AST/TGO ALT/TGP GGT Amilase Lipase CK LDH Fosfatase Alcalina
Fosfatase Ácida
Maiores
concentrações: próstata, no fígado, na medula óssea, nos eritrócitos e plaquetas.
Fosfatase Alcalina
Maiores concentrações: presente em praticamente todos os tecidos do organismo, especialmente nas membranasdas células dos túbulos renais, ossos (superfície dos osteoblastos), placenta, trato intestinal e fígado. Função: transporte de lipídios no intestino e nos processos de calcificação óssea.
fração não-prostática: crianças em fase de crescimento e patologicamente aumentada em condições em que existe um hipermetabolismo ósseo.
Utilidade diagnóstica:
diagnóstico e monitoramento da resposta aotratamento e monitoramento de metástases, no CA de próstata.
2
Fosfatase Alcalina
Utilidade Diagnóstica: doenças ósseas que cursam : com aumento da atividade osteoblástica e na investigação de doenças hepatobiliares.
A resposta hepática a qualquer tipo de agressão da árvore biliar é sintetizar fosfatase alcalina principalmente nos canalículos biliares.
TGO ou AST
Maiores
Transaminase GlutâmicoOxalacética / Aspartato Amino Transferase
concentrações: encontrada em diversos órgãos e tecidos, incluindo coração, fígado, músculo esquelético e eritrócitos.
Citoplasma e mitocôndrias Utilidade
Diagnóstica: hepatites virais agudas, hepatites alcoólicas, metástases hepáticas e necrose medicamentosas e isquêmicas, e infarto agudo do miocárdio.
Recém-nascidos,
crianças, e especialmente...