Fabrica De Embutidos

U.E. Colegio Champagnat.
11 / 2 / 2012

Informe De Laboratorio Biología

Integrantes:

Samuel Mariño # 12
Marco Mayer # 13
Carlos Luis # 11

Introducción.
En el trabajo de investigación desarrollado encontraremos información sobre los aminoácidos en la hemoglobina, su estructura y función. La insulina su clasificación y estructura secundaria. Y por último la importancia de conocer lasecuencia del ARNm. En este trabajo se encontraran términos específicos explicados explícitamente en un lenguaje técnico, desarrollados así para la facilidad de entendimiento de un lector con conocimientos medios en lo que respecta la síntesis de proteínas.

¿Cuántos aminoácidos (residuos) conforman a la hemoglobina? ¿Cómo es una estructura terciaria y cuaternaria? ¿Qué función posee?
Lashemoglobinas de todos los mamíferos tienen un peso molecular aproximado de 65.000 y en esencia son tetrámeros, que constan de 4 cadenas péptidas, cada una de las cuales está unida a un grupo hem. Las moléculas de hemoglobina se forman por combinación de dos subunidades de una cadena peptídica llamada ay dos de bdonde las cadenas polipeptídicas están constituidas por eslabones de aminoácidos (AA)denominados residuos; conteniendo 141 residuos la cadena ay 146 la cadena b. Todo ser humano es capaz de sintetizar (genéticamente) e introducir en la hemoglobina cuatro cadenas polipéptidas designadas a, b, gy d. Con escasas excepciones las moléculas de HB se forman por la combinación de dos cadenas a con dos go d. La HB de una persona adulta normal se designa por HB A = a2A b2A y de igual forma, laHB fetal es HB A = a2Ag2F Las cadenas b, g, d contienen todas ellas 146 unidades que se asemejan mucho entre sí en la secuencia de AA, hay solo 39 residuos de AA diferentes entre las cadenas b y gy solo 10 entre by d.
La cantidad de AA se puede determinar por métodos químicos o enzimáticos.
Reactivos químicos:
SANGER: Emplea 2,4 Dinitrofluorobenceno (DNF), en solución ligeramente alcalina y atemperatura ambiente, este pasa a ser parte del polipéptido en el N terminal, posteriormente este se hidroliza, quedando el dinitrofenil aminoácido de color amarillo y los otros aminoácidos en estado libre. Después estas se separan cromatográficamente para su identificación.
EDMAN: Se hace reaccionar la hemoglobina con fenilisotiosianato que se combina con el grupo a amino libre de la Valina,posteriormente se coloca el péptido con ácido diluido y frió, lo que separa la Valina de la cadena principal y lo convierte en un derivado de la feniltiovidantoina mas el péptido del nuevo n-terminal de la Leucina.
BROMURO DE CIANOGENO: Separa los enlaces peptídico por el lado carboxilo de los residuos de metionina dejando nuevas unidades peptídicas.
CLORURO DE DABSILO: Se utiliza para marcar elpéptido que después se hidroliza con HCl, se identifica por sus características cromatograficas. Suele utilizarse el cloruro de babsilo porque forma derivados altamente coloreados que se detectan con alta sensibilidad. Este reacciona con el amino libre de una amina para formar un derivado sulfoamidico, que resulta estable en las condiciones que permite hidrolizar los enlaces peptídico.
Reactivosenzimáticos:
TRIPSINA: La tripsina es un enzima proteolítica del jugo intestinal. Hidroliza los péptido por el lado carboxílico de los residuos de Argina y Lisina tanto la tripsina como el Bromuro de Cianógeno (CNBr) son más efectivos para péptido de más de 50 residuos.
CARBOPÈPTIDASAS: Hidroliza al enlace peptídico en que interviene el residuo terminal COOH, de esta manera se determina el aminoácido,que se libera por acceso de la carboxipeptidasa sobre el polipéptido. Conociendo los residuos amino y carboxilo terminal se establecen puntos de referencia importantes en la secuencia de aminoácidos.
AMINOPEPTIDASA: Hidroliza al enlace peptídico en que interviene el residuo terminal NH2.
Se realizó el análisis de las cantidades relativas de aminoácidos en la cadena de ben 24 AA (de AA 36 al...