Lab quimica Identificacion de levaduras
Páginas: 5 (1138 palabras)
Publicado: 20 de agosto de 2013
Identificación de levaduras
RESUMEN: Para la identificación de levaduras se requiere realizar una serie de pruebas, de manera que se evidencie las características distintivas de la especie de levadura. La prueba del tubo germinativo o filamentacciòn se usa para observar el desarrollo o formación de hifas, blastoconidias, clamidosesporas y artrosporas y constituye una característicamorfológica de gran importancia para la identificación de algunas especies de levaduras. La presencia de pseudohifas y blastoconidias, fue útil para identificar si la levadura pertenece a alguna especie del género Candida. El cultivo de levaduras en agar harina de maíz favorece la formación de pseudohifas y blastoconidios, de modo que puede hacerse la identificación presuntiva de especies deCandida. Lasespecies de Candida sp, dan negativa la prueba de la urea. Otra prueba útil fue la prueba de Asimilación de carbohidratos, los patrones de asimilación de azúcares (glucosa, lactosa, sacarosa, maltosa, galactosa, dextrosa y rafinosa) permiten identificar las diferentes especies de Candida spp. Mediante el análisis de los resultados de las pruebas realizadas se logró la identificación presuntiva dela levadura Candida parapsilosis.
INTRODUCCIÓN
Las levaduras forman colonias de organismos unicelulares. Algunas especies de levaduras forman yemas que no logran separarse y dan lugar a una corta cadena de células llamada “Pseudohifa”. Se requiere una combinación de pruebas bioquímicas y morfológicas para identificar las levaduras. En las características morfológicas debeincluirse el color de las colonias, la medida y la forma de las células, la presencia de cápsula, la producción de hifas o pseudohifas, y la producción de clamidiosporas. Las pruebas bioquímicas incluyen la asimilación y fermentación de azúcares, prueva de la urea y la asimilación de nitrato.
El cultivo de levaduras en agar harina de maíz favorece la formación de pseudohifas y blastoconidios, de modoque puede hacerse en la identificación presuntiva de especies de Candida. En la prueba de Asimilación de carbohidratos los patrones de asimilación de azúcares (glucosa, lactosa, sacarosa, maltosa, galactosa, dextrosa y rafinosa) permiten identificar las diferentes especies de Candida spp. Interpretación: Positivo: viraje del color del medio de cultivo hacia el amarillo. Negativo: no se produceviraje de color, permaneciendo el color del medio de cultivo.
La Producción de ureasa se basa en la capacidad de producir la enzima ureasa, la cual desdobla la urea en dióxido de carbono y amonio, incrementando el pH del medio y produciendo un cambio de color rojo púrpura en el indicador. Las especies de Candida sp, dan negativa la prueba de la urea.
Candida parapsilosis Macroscópicamente cuando se cultiva en agar dextrosa Sabouraud, las colonias de C. parapsilosis son de color blanco, cremoso, brillante y lisa o arrugada. Microscópicamente la célula tiene forma aracniforme, aspecto de un arbusto. C. parapsilosis no forma hifas verdaderas y existe ya sea en una fase de la levadura o una forma pseudohifa. Las pseudohifa se han observado en agar harina de maíz.
El objetivode la presente práctica de laboratorio es identificar una levadura problema, mediante las siguientes pruebas: Filamentación de levaduras, morfología en agar harina de maíz, prueba de asimilación de carbohidratos y prueba de la ureasa.
MATERIALES Y MÉTODOS
Filamentación de levaduras.
En un tubo de 12 x 75 mm se colocaron 0.5 mL de suero humano y en el mismo se inoculo ligeramentede la colonia de levaduras (92). Se incubo el tubo a 37 ºC por 2-3 horas. Trascurridas las tres horas, se colocó una gota de la suspensión en un portaobjeto y se cubrió con un cubreobjetos, para finalmente observarse al microscopio con un objetivo seco.
Morfología de las levaduras en agar harina de maíz.
En una placa con agar harina de maíz se inoculo por estría la levadura...
RESUMEN: Para la identificación de levaduras se requiere realizar una serie de pruebas, de manera que se evidencie las características distintivas de la especie de levadura. La prueba del tubo germinativo o filamentacciòn se usa para observar el desarrollo o formación de hifas, blastoconidias, clamidosesporas y artrosporas y constituye una característicamorfológica de gran importancia para la identificación de algunas especies de levaduras. La presencia de pseudohifas y blastoconidias, fue útil para identificar si la levadura pertenece a alguna especie del género Candida. El cultivo de levaduras en agar harina de maíz favorece la formación de pseudohifas y blastoconidios, de modo que puede hacerse la identificación presuntiva de especies deCandida. Lasespecies de Candida sp, dan negativa la prueba de la urea. Otra prueba útil fue la prueba de Asimilación de carbohidratos, los patrones de asimilación de azúcares (glucosa, lactosa, sacarosa, maltosa, galactosa, dextrosa y rafinosa) permiten identificar las diferentes especies de Candida spp. Mediante el análisis de los resultados de las pruebas realizadas se logró la identificación presuntiva dela levadura Candida parapsilosis.
INTRODUCCIÓN
Las levaduras forman colonias de organismos unicelulares. Algunas especies de levaduras forman yemas que no logran separarse y dan lugar a una corta cadena de células llamada “Pseudohifa”. Se requiere una combinación de pruebas bioquímicas y morfológicas para identificar las levaduras. En las características morfológicas debeincluirse el color de las colonias, la medida y la forma de las células, la presencia de cápsula, la producción de hifas o pseudohifas, y la producción de clamidiosporas. Las pruebas bioquímicas incluyen la asimilación y fermentación de azúcares, prueva de la urea y la asimilación de nitrato.
El cultivo de levaduras en agar harina de maíz favorece la formación de pseudohifas y blastoconidios, de modoque puede hacerse en la identificación presuntiva de especies de Candida. En la prueba de Asimilación de carbohidratos los patrones de asimilación de azúcares (glucosa, lactosa, sacarosa, maltosa, galactosa, dextrosa y rafinosa) permiten identificar las diferentes especies de Candida spp. Interpretación: Positivo: viraje del color del medio de cultivo hacia el amarillo. Negativo: no se produceviraje de color, permaneciendo el color del medio de cultivo.
La Producción de ureasa se basa en la capacidad de producir la enzima ureasa, la cual desdobla la urea en dióxido de carbono y amonio, incrementando el pH del medio y produciendo un cambio de color rojo púrpura en el indicador. Las especies de Candida sp, dan negativa la prueba de la urea.
Candida parapsilosis Macroscópicamente cuando se cultiva en agar dextrosa Sabouraud, las colonias de C. parapsilosis son de color blanco, cremoso, brillante y lisa o arrugada. Microscópicamente la célula tiene forma aracniforme, aspecto de un arbusto. C. parapsilosis no forma hifas verdaderas y existe ya sea en una fase de la levadura o una forma pseudohifa. Las pseudohifa se han observado en agar harina de maíz.
El objetivode la presente práctica de laboratorio es identificar una levadura problema, mediante las siguientes pruebas: Filamentación de levaduras, morfología en agar harina de maíz, prueba de asimilación de carbohidratos y prueba de la ureasa.
MATERIALES Y MÉTODOS
Filamentación de levaduras.
En un tubo de 12 x 75 mm se colocaron 0.5 mL de suero humano y en el mismo se inoculo ligeramentede la colonia de levaduras (92). Se incubo el tubo a 37 ºC por 2-3 horas. Trascurridas las tres horas, se colocó una gota de la suspensión en un portaobjeto y se cubrió con un cubreobjetos, para finalmente observarse al microscopio con un objetivo seco.
Morfología de las levaduras en agar harina de maíz.
En una placa con agar harina de maíz se inoculo por estría la levadura...
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