Laboratorio De Cromatografia

LABORATORIO DE CROMATOGRAFIA


MARCO TEORICO: Es un conjunto de técnicas basadas en el principio de retención selectiva, cuyo objetivo es separar os distintos componentes de una mezcla, permitiendo identificar y determinar la cantidades de dichos componentes, este método físico de separación se utiliza para la caracterización de mezclas complejas, la cual tiene aplicación en todas las ramas dela ciencia y la física.
Se encuentran varias técnicas cromatografías y en todas ellas encontramos una fase móvil que consiste en un fluido (gas, líquido o fluido súper crítico) que arrastra la muestra a través de una fase estacionaria que se trata de un sólido o un líquido fijado en un sólido, los compuestos de la mezcla interactúan de distinta manera con la fase estacionaria así de estamanera, los componentes pasan la fase estacionaria a distintas velocidades y se van separando. Después de que los componentes pasaron por la fase estacionaria separándose se disponen a pasar por un detector que produce una señal que puede depender de la concentración y el tipo de compuesto.
Clasificación métodos de separación: Clasificación de la cromatografía.

TIPOS FASE MOVIL FASE ESTACIONARIACromatografía liquida en fase normal Liquido (menos polar) SS
Solido o liquido polar
Cromatografía liquida de absorción Liquido Solido
Cromatografía liquida en fase inversa Liquido (polar) Solido o liquido (menos polar)
Cromatografía liquida de exclusión Liquido Solido
Cromatografía liquida de intercambio iónico Liquido (polar) Solido
Cromatografía de fluidos súper críticos Liquido SolidoCromatografía en papel Liquido Liquido (moléculas de agua contenidas en la celulosa del papel)
Cromatografía en capa fina Liquido Solido
Cromatografía de gases Gas Solido o liquido


Vocabulario:
Faces, exclusión, fluido súper crítico.

Preguntas:
Cromatografía en capa fina
Resuelva las siguientes preguntas:

1. ¿En que se basa la cromatografía?
Rta/ se basa en la separación de lasustancias que componen una mezcla.
2. ¿Cuáles son sus fases y para qué sirven?
Rta/ fase estacionaria, llamada absorbente y una fase móvil llama eluyente se encarga de disolver y desplazar a las sustancias sobre la absorbente.
3. ¿Cómo es el orden de elución de las sustancias?
Rta/ es inverso a su polaridad, las mas polares aparecen en la parte baja de la placa, y las menos polares en laparte superior.
4. ¿Cuáles son los pasos de la cromatografía en capa fina?
Rta/
1. Preparación de la capa cromatografica
2. La placa se debe marcar con un lápiz una línea recta a un centímetro del borde de la placa, y marcar los puntos donde se van a aplicar las muestras.
3. Elegir el eluyente adecuado.
4. Se aplica la muestra con un capilar sobre la placa.
5. Se prepara la cubeta decromatografía
6. Se deja subir el eluyente hasta aproximadamente un centímetro del borde.
7. Se saca la placa y se marca con un lápiz la línea de altura máxima q alcanzo el eluyente.
8. Se deja secar la placa.
9. Se visualizaran las marcas sobre la placa por medio de una luz uv o directamente si fueron coloreadas.
5. ¿Cómo se determina el factor de retención?
Se define como el cociente entre ladistancia q ahí desde el centro de la mancha hasta la line de aplicación, y la distancia q recorrió el eluyente desde la línea de aplicación hasta la posición final del frente, y el resultado no puede ser mayor a uno ni menor de cero.


Cromatografía de columna
Resuelva las siguientes preguntas:

1. ¿Cómo se prepara la columna?
Rta/
1. se asegura la columna en la base
2. se ponealgodón en la parte de fondo de la columna sin hacerle mucha precion con el fin de que deje pasar el eluyente.
3. después de ubicado el algodón se dispone a adicionar arena de mar de 10 a 12 mm.
4. se prepara una suspensión espesa del absorbente en el eluyente.
5. esta mezcla se añade por medio de un embudo sobre el eluyente q ya está en la columna.
6. se deja salir el exceso de eluyente.
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