Métodos Histologicos

Preparación e investigación de tejidos muertos
El estudio de células y tejidos tienen aplicaciones limitadas. Es difícil diferenciar los componentes con la microscopia de transmisión ya que esta tiene igual grado de refracción de la luz, lo más común es que el tejido presente un espesor tal que la penetración de la luz es demasiado escasa y en consecuencia de estos sucesos se utiliza con mayorfrecuencia los tejidos muertos, que se mantienen mediante acciones químicas al instante de ser extraídos y entonces estos se cortan en secciones muy delgadas, llamadas cortes histológicos. Después de la tinción con diferentes colorantes se pueden observar los cortes con el microscopio óptico. Lógicamente al hacer todo este proceso de los cortes histológicos se procura mantener el aspecto de lasestructuras en el organismo vivo.
Preparación de tejidos para microscopia óptica
Fijación: para mantener los procesos celulares con mayor rapidez posible y seguir teniendo la estructura con los mínimos cambios posibles las células se matan con la fijación. Esto se da con la insolubilización de los componentes estructurales de la célula y la formación de enlaces cruzados. En este proceso defijación se estabilizan las proteínas, porque los fijadores favorecen la formación de enlaces cruzados entre las moléculas proteicas y de esta forma se mantienen las relaciones entre las estructuras como en la célula viva. Las proteínas solubles se unen a las estructurales y se transforman así en insolubles. Ciertos fijadores como, por ejemplo, el formaldehido y el glutaraldehído son especialmenteefectivos en la formación de enlaces transversales. Mantienen el aspecto de la célula en condiciones a las que se pueden ver con el microscopio de contraste de fase. La fijación de igual manera produce la inactivación de algunas de las enzimas celulares, las cuales de otro modo iniciaran la autodigestión o autolisis y conducirán a la degeneración post mortem, no solo esto sino que también se eliminanbacterias y otros microorganismos, que podrían destruir el tejido.
Para los tejidos humanos la extracción de tejido se puede obtener mediante procedimientos quirúrgicos o por biopsia; de igual forma es posible tomar muestras de órganos internos como por ejemplo, el hígado o el riñón, mediante cánulas especiales. Después de hacer todo este procedimiento de la extracción se sumerge en el fijador, enla fijación por inmersión que a diferencia de la fijación por perfusión, se puede aplicar a animales de experimentación; si fuera este el caso se inyectaría el fijador en el torrente sanguíneo del animal vivo y el fijador lega por vía hematógena rápidamente a todo el tejido. De esta manera se logra matar todas las células de un órgano completo después de interrumpir la admisión de oxigeno, y seobtiene una fijación más rápida y uniforme. Estos métodos se aplican en trabajos muy exigentes por ejemplo preparados para la microscopia electrónica.
Inclusión y corte
El tejido fijado se corta en secciones delgadas que permitan el paso de la luz. Para obtener la consistencia necesaria para poder cortar secciones tan delgadas es necesario incluir antes el tejido en un material que alsolidificarse le confiera suficiente dureza. Las sustancias adecuadas para llegar a este resultado son los medios de inclusión esto se refiere a tipos de cera insolubles en agua, por lo general la parafina. En consecuencia, antes de la inclusión es necesario deshidratar el tejido. Para esto se pasa el tejido por soluciones acuosas de etanol. El tejido se sumerge en un líquido miscible en etanol y parafina,por ejemplo xileno, proceso denominado aclaramiento. Después de este proceso se coloca el tejido en parafina liquida que disuelve el xileno y penetra así en el tejido. Al enfriar se solidifica la parafina y forma, junto con el tejido incluido, un bloque sólido o “taco”.
Método de congelación – desecación
El objetivo de este método es lograr que la variación estructural y la extracción...