microscopio claro

BIOLOGIA
Microscopia: Iluminación y diversidad celular
Introducción
El tamaño de las células escapa al poder de resolución del ojo que se define como la distancia mínima entre dos puntos
para que puedan verse objetos separados. El descubrimiento de las células fue posible a partir de la invención del
microscopio compuesto. El conocimiento de la célula y el papel que juega en la formaciónde los tejidos animales y
vegetales ha avanzado de manera paralela al perfeccionamiento de las técnicas de microscopia. Una célula animal típica
mide entre 10 y 20 µm de diámetro, unas cinco veces menos que el diámetro de la partícula más pequeña observable
por el ojo humano.
Se han desarrollado diferentes sistemas de iluminación para el microscopio, que permiten observar células o tejidosvivos o fijados y teñidos.
El microscopio de campo claro es útil para la observación de material teñido, la tinción incrementa el contraste entre la
muestra y el medio que lo rodea. La imagen formada resalta sobre un fondo blanco brillante. En este sistema, el trayecto
que sigue la luz va desde la lámpara hasta el ojo del observador pasando por un sistema de lentes que la alinea y la
concentra.August Köhler (1866-1948), físico alemán, desarrolló un sistema que permite el alineamiento del sistema óptico con el
sistema de iluminación sobre un mismo eje. Esto se realiza tomando como referencia el diafragma del campo, que es un
dispositivo que se encuentra sobre la fuente de luz, que regula la apertura para el paso de ésta. El diafragma de campo
permite centrar el condensador móvil. Lailuminación de Köhler crea un campo visual que ilumina uniformemente el
espécimen. Está técnica evita la aberración cromática, mejorando la resolución de las imágenes. Se pueden cambiar los
objetivos (10X, 40X y 100X), sin tener que volver a alinear el sistema (Figura 1).
Para el uso correcto del microscopio es indispensable que al inicio de cualquier observación se realice la iluminación deKöhler alineando el condensador con respecto a la fuente de luz, su finalidad es obtener la iluminación óptima de la
muestra.

Figura 1. Microscopio de campo claro

υ



CURSO DE BIOLOGIA_IBQ

Objetivo
Identificar las partes del microscopio de campo claro, aprender a realizar la iluminación de Köhler y observar diferentes
tipos celulares.

Material
Microscopio de campo claro
1lanceta
Papel de seda
Aceite de inmersion
1 vidrio de reloj
3 pipetas Pasteur
Pinzas de disección
Piseta con etanol
algodón
2 mL de azul de metileno 0.2%
2 mL de safranina al 1.0%
2 mL de NaCl al 0.9%
1 bisturi
Porta y cubre objetos
Hisopos estériles

Muestra (traer para la práctica)
Cebolla
Elodea (planta que se utiliza en las peceras)

Método
Para que los microscopios proporcionenimágenes de buena calidad las lentes deben estar limpias, por lo que debe
evitar tocarlas, ya que las huellas digitales alteran la calidad de la imagen observada. Solo si es imprescindible debe
limpiar las lentes, para llevarlo a cabo utilice únicamente papel especial para la limpieza de las lentes (papel seda), no
emplee pañuelos desechables ni cotonetes. En el ambiente hay pequeñaspartículas de polvo y si no se utiliza el material
adecuado las lentes se deterioran dañando la calidad de la imagen.
Use aceite de inmersión solo cuando va a utilizar el objetivo de 100X. Evite que los demás objetivos entren en contacto
con el aceite. Al finalizar la sesión de laboratorio siempre limpie el aceite de la lente.

I. Iluminación de Köhler. Observación de preparaciones histológicas de lacolección.
1. Identifique con la ayuda de la figura 1, las partes del microscopio y verifique su funcionamiento.
2. Abra el diafragma de iris y el de campo.
3. Suba el condensador hasta el tope, utilizando el tornillo del potacondensador (Figura 2).

φ



CURSO DE BIOLOGIA_IBQ

Figura 2. Vista lateral del condensador

4. Seleccione el objetivo 10X.
5. Ajuste la distancia...