Quinina
Fundamento:
La fluorescencia consisite en la absorción de radiación electromagnética por parte de las moléculas, que pasan aestado excitado, para posteriormente emitir parte de esa energía también en forma de radiación electromagnética. La intensidad de radiación emitida es proporcional a la concentración de fluorógeno en lamuestra.
Un compuesto fluorógeno es el sulfato de quinina. Este compuesto se encuentra en el agua de tónica y en esta práctica se propone su determinación. Presenta una eficacia cuántica defluorescencia bastante elevada, utilizandose por ello como patrón de fluorescencia. Asimismo se utiliza como indicador fluorescente acido-base: intervalo de viraje 9,5 - 10 ( fluorescente - no fluorescente ).Es extemadamente sensible a la presencia de iones haluros, de forma que en HCl 0,1N no es fluorescente.
La máxima intensidad de fluorescencia la presenta en H2SO4 0,1N. Máximos de excitación: 250 y350 nm (longitud de onda de emisión = 450 nm). Máximos de emisión :450 nm (longitud de onda de excitación = 350 )
Material e instrumentación.
• Vasos de precipitado de 500 ml.
• Matraces aforados de50, 100, y 1000 ml.
• Pipetas de 1,2,5 y 10 ml
• Espectrofluorímetro.
Disoluciones necesarias.
• Disolución de ácido sulfúrico 0,1M.
• Disolución de sulfato de quinina en H2SO4 0,1M de 1mg/lProcedimiento operatorio.
- Preparación de la curva de calibrado.
En un matraz de 50ml preparamos una disolución que contenga 80 µg/l de sulfato de quinina en ácido sulfúrico 0,1M.
Introducimos unaelicuota de la disolución anterior en la cubeta de cuarzo de 1cm de paso de luz y registamos el espectro de excitación, tomando como longitud de onda de emisión 450 nm. Utilizando la longitud de onda deexcitación máxima, registramos el expectro de emisión.
Partiendo de la disolución de 1000 µg/l, preparamos 4 disoluciones que contienen 20, 40, 60 y 80 µg/l de sulfato de quinina en ácido...
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