ria

1. FUNDAMENTO TEÓRICO
Es una técnica inmunológica propuesta en 1959 por Yalow y Berson, que tiene una gran aplicación en clínica. Rosalyn Yalow recibió en 1977 el Premio Nobel en medicina por haber desarrollado junto con Solomon Berson la técnica del radioinmunoensayo (RIA). Lo habría podido ganar antes, pero la muerte de Berson en 1972 hizo que no prosperara la propuesta. Hasta entonces lacoautoría de sus trabajos nunca había sido cuestionada, pero tuvo que demostrar que no era cierto que Berson fuera el cerebro y ella las manos. La técnica del RIA es uno de los grandes descubrimientos del siglo xx. La utilización de isótopos radioactivos permitió analizar la concentración de compuestos biológicos que hasta aquel momento eran imposibles de determinar. Supuso una gran revolución entodas las áreas de las ciencias biomédicas al hacer posible el diagnóstico de enfermedades debidas a disfunciones hormonales, la identificación en sangre de antígenos asociados a hepatitis y la detección de virus en muestras biológicas. El RIA es una técnica analítica que por su doble condición de ser inmunológica e isotópica es específica y de gran sensibilidad, por lo tanto se utiliza paradeterminar un gran número de parámetros biológicos que se encuentran en concentraciones muy bajas.
Permite la cuantificación exacta de compuestos biológicos presentes en el organismo en concentraciones tan bajas como ng/ml (nano gramos/mililitro) o incluso de pg/ml (pico gramos/mililitro), incluso hacerlo en mezclas con enormes cantidades y diversidad de materiales extraños, por lo que no es necesariopurificar previamente la muestra.
El radioinmunoensayo (RIA, del inglés Radio-Immuno Assay) es un método radioinmunométrico y fue la primera de las técnicas de unión competitiva de proteínas desarrollada. Se basa en la formación específica de los complejos antígeno-anticuerpo (Ag-Ac), lo que le confiere una gran especificidad unido a la sensibilidad de los métodos radiológicos.
Por la ley de acciónde masas, los sitios de unión del anticuerpo serán ocupados por los antígenos marcados y endógenos, en forma proporcional a las concentraciones relativas que tienen en el medio de reacción.
Con estos tres componentes antígeno no marcado (Ag), antígeno marcado (Ag*) y anticuerpo (Ac) se puede realizar el ensayo, en el cual manteniendo constante la cantidad de Ag* y Ac se observará que a mayorcantidad de Ag menos Ag* queda unido a la cantidad fija de Ac, y por tanto menos radiactividad, lo que permitirá relacionar la radiactividad con la concentración de Ag.
Para ello es imprescindible que se cumplan dos condiciones:
1. Que el anticuerpo se encuentre en concentración limitada (para que haya concurrencia entre antígeno marcado y no marcado por sus sitios de unión).
2. Que exista similaravidez de ambos antígenos, por los sitios de unión del anticuerpo.
Las características más importantes de un anticuerpo para que sea utilizado en el RIA son: alta especificidad, gran avidez por el antígeno y elevado título.
El anticuerpo debe ser utilizado en una concentración conocida y limitada, para que la reacción se mantenga en la llamada zona de equivalencia. Si el anticuerpo es levantado con elmismo antígeno que se va a detectar, y el antígeno marcado también, se considera un ensayo homólogo, en el caso contrario, es un ensayo heterólogo.
La principal diferencia es que para los ensayos heterólogos se considera necesario un determinado tiempo de ventaja para el antígeno que se va a detectar, si es el de especie distinta. Por tanto, en lugar de un RIA de competencia, se convertiría en unensayo de saturación, lo que permite que el antígeno endógeno se una preferentemente al anticuerpo y luego se añade el antígeno marcado, que satura los sitios libres del anticuerpo.
Este tipo de ensayo de saturación también se utiliza para antígenos que se encuentran en muy pequeñas concentraciones (por ejemplo, las hormonas hipofisarias).
El desarrollo de anticuerpos monoclonales mejoró de...